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背景: 癌基因的激活在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。结肠癌转移相关基因1(Metastasis-associated in colon cancer1,MACC1)是近年来新发现一种的癌基因(oncogene),已有的报道证实其参与了结肠癌、肝癌、肺癌等多种肿瘤的发病过程。后续的研究还发现,MACC1的表达和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)及其受体(receptor tyrosine kinases,c-Met)的激活调节有关,HGF/c-Met信号通路已被证明参与多种肿瘤的发病过程。然而,MACC1是否通过影响HGF/c-Met信号通路参与了食管癌的发生发展过程并不清楚。本研究拟通过检测食管癌组织中MACC1及c-Met蛋白的表达情况,寻找MACC1参与食管癌发病的临床证据,并通过分析MACC1与c-Met蛋白的表达相关性来探讨MACC1参与食管癌发病的潜在作用机制。 方法: 1.随机入组2006年6月至2009年6月期间在中国人民解放军第四军医大学唐都医院胸腔外科行手术治疗的食管癌患者88例并收集术中切除的肿瘤组织,术前未行任何治疗,包括放疗及化疗。结合影像学资料及手术探查情况、进行TNM分期判定,经中国人民解放军第四军医大学唐都医院病理科诊断组织病理分期及分化程度。食管癌组织经免疫组织化学染色后按照半定量积分法进行结果判定。本研究中两组资料间的比较采用Mann-Whitney U检验,采用Kruskal-Wallis H检验比较3组及3组以上资料间的差异,相关性分析采用spearman秩相关检验。 2.Real-time RT-PCR法、Western blot方法检测食管癌组织中MACC1、c-Met基因和蛋白的表达。 结果: 1.免疫组织化学染色结果显示MACC1与c-Met蛋白主要在食管癌细胞的胞质中表达。 2.MACC1蛋白在食管鳞癌中的阳性表达率为88.64%。其中,男性患者中的阳性表达率为90.00%,女性患者中的阳性表达率为83.33%,两者之间无明显差异(P=0.733);60及以上周岁患者中的阳性表达率为88.68%,60周岁以下患者中的阳性表达率为88.57%,两者之间无明显差异(P=0.979)。MACC1蛋白在病理分级Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ级肿瘤组织中的阳性表达率分别为14.29%、93.65%、100.00%;在TNM分期Ⅰ/Ⅱa/Ⅱb/Ⅲ期肿瘤组织中的阳性表达率分别为16.67%、89.47%、100.00%、100.00%。经统计学分析,MACC1的表达在不同病理分级和 TNM分期中具有显著性差异(P值均<0.001)。 3.c-Met蛋白在食管鳞癌中的阳性表达率为75.00%。其中,男性患者中的阳性表达率为78.57%,女性患者中的阳性表达率为61.11%,两者之间无明显差异(P=0.197);60及以上周岁患者中的阳性表达率为73.58%,60周岁以下患者中的阳性表达率为77.14%,两者之间无明显差异(P=0.887)。c-Met蛋白在病理分级Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ级肿瘤组织中的阳性表达率分别为0.00%、76.19%、100.00%;在 TNM分期Ⅰ/Ⅱa/Ⅱb/Ⅲ期肿瘤组织中的阳性表达率分别为0.00%、100.00%、100.00%、100.00%。经统计学分析,c-Met的表达在不同病理分级和TNM分期中具有显著性差异(P值均<0.001)。 4.MACC1蛋白在食管鳞癌中表达率高于c-Met蛋白,Spearman检验显示二者表达在总的食管鳞癌、中低分级以及TNM分期组间显著相关(相关系数均>0.398, P值均<0.001,)。 5. real-time RT-PCR实验结果显示:相比于癌旁组织,MACC1和c-Met基因在食管癌组织中均高表达。Western Blot实验结果显示:相比于癌旁组织,MACC1和c-Met蛋白在食管癌组织中均高表达。 结论: 1.IHC法检测MACC1和c-Met蛋白在食管癌组织中均有较高的阳性表达率,而且表达高低与食管癌的病理分级及TNM分期相关,与年龄及性别无明显相关性,表明MACC1和c-Met蛋白可能在食管癌的发生发展中发挥着重要作用。 2.MACC1和 c-Met蛋白在食管癌中的表达具有明显的相关性,提示 MACC1可能通过影响HGF/c-Met信号通路来参与食管癌的发病过程。 3.real-time RT-PCR和Western Blot方法检测MACC1、c-Met基因和蛋白在食管癌组织中均有较高的表达,从组织学上进一步证实了MACC1可能通过活化HGF/c-Met信号通路参与食管癌的发病过程。