为了解广东省PRRSV的流行情况,2017年从广东地区各规模化猪场采集了4 456份猪血清样品用于抗体检测,305份组织样品用于病原检测。最终检出抗体阳性血清3 263份,阳性率为73.23%(95%CI:71.90%~74.52%),整体抗体水平较高;检出抗原阳性样品114份,阳性率为37.38%(95%CI:31.93%~43.07%),抗原阳性率较过去5年略有上升。为了解PRRSV的抗原抗体水平与季度的关系,将检测结果按季度归类整理。结果显示,从第一季度到第四季度,抗体阳性率分别为69.45%、70.73%、77.66%、79.46%;抗原阳性率分别为62.16%、38.60%、33.33%、29.57%。这些数据表明,从第一季度到第四季度,PRRSV的抗体水平呈上升趋势,而抗原阳性率呈下降趋势。为了解PRRSV的抗原抗体水平与地区的关系,将检测结果按地理区域归类整理。结果显示,粤北地区的抗体阳性率最高,达到91.60%,但抗原检出率最低却是珠三角地区,为29.19%。粤东地区送检了更多的血清样品用于抗体检测,但抗体水平却在四个地区中最低,为68.66%。而粤西地区则送检了更多的组织样品用于病原检测,病原检出率居于四个地区首位,达到50.53%。这些数据表明,地区间的抗体水平和抗原阳性率没有明显的相关性。为了解广东地区流行的PRRSV毒株类型,对抗原检测为阳性的病料进行ORF5基因的扩增和测序。最终获得了25条ORF5序列。随后对这25条序列进行遗传进化分析和氨基酸位点突变分析。遗传进化分析表明分离的序列中有14株属于Lineage 8中的Sublineage 8.7,有9株属于Lineage 3,有2株属于Lineage 1。基于ORF5序列的遗传进化分析表明,广东省流行的PRRSV毒株主要为Lineage 8中的Sublineage8.7。氨基酸分析表明,广东地区分离的ORF5序列存在着广泛的氨基酸位点突变,且突变位点存在明显的亚群特征。为了后续对广东省PRRSV的分子流行病学进一步的研究,选取三个亚群对应的病料进行病毒分离并成功分离了3株PRRSV毒株,经过病毒的全基因组测序、间接免疫荧光试验鉴定、病毒全基因组的遗传进化分析等方法鉴定,这3株PRRSV毒株分别属于Lineage 8、Lineage 3和Lineage 1。为了便于对HP-PRRSV的功能结构和致病机理进行研究,本研究将PRRSV JXA1株的全基因组分段克隆至pOKq载体上,并在病毒基因的两端分别添加CMV启动子序列和BGH终止信号肽序列,成功构建了JXA1株的全长感染性克隆。病毒拯救结果显示,遗传标记被成功引入,拯救病毒与亲本毒能产生相似的细胞病变和生长曲线。JXA1株反向遗传平台的成功构建,将为研究PRRSV的致病机理,基因功能提供技术支持。