EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)是1964发现的一种人类γ疱疹病毒,EBV在全球人群中的感染率高达95%以上,并以潜伏感染状态在宿主体内终身携带。EBV感染与多种人类疾病相关,而且EBV是第一种被发现的肿瘤相关病毒。全球每年20万例新发肿瘤与EBV相关,并且1.8%左右的癌症死亡是由EBV相关肿瘤所导致。免疫抑制和免疫缺陷人群更易发生EBV阳性肿瘤;与发达地区相比,发展中地区具有更高的EBV相关肿瘤发生率。我国是EBV阳性肿瘤高发国度,尤其是鼻咽癌和胃癌,这对人民健康造成巨大威胁。鉴于EBV阳性肿瘤细胞内多含有处于潜伏感染状态的EBV,而且EBV同时是一种溶瘤病毒,这便提供了通过诱导EBV进入裂解感染状态而杀伤肿瘤细胞的治疗方式。该治疗方式已被多项临床实验证实行之有效,可以明显改善患者的生存质量并延长生存时间。然而目前临床上可供选用的诱导EBV裂解感染的药物还十分有限,因此亟需开发新的药物用于治疗EBV阳性肿瘤。虫草素(cordycepin)是从传统中药冬虫夏草中提取的单体小分子化合物,具有抗炎、抗肿瘤和免疫调节等多种生物学作用。本文通过研究发现,虫草素可以通过PKC、p38 MAPK以及MEK等信号通路激活肿瘤细胞内的EBV进入裂解感染期,并且虫草素对EBV阳性肿瘤细胞具有一定的选择杀伤作用。联合作用实验显示,虫草素可以明显增强传统化疗药物阿霉素(doxorubicin)激活EBV裂解感染的能力,同时虫草素可以显著增强阿霉素对EBV阳性肿瘤细胞的杀伤能力。通过分子机制研究发现,虫草素和阿霉素联合使用可以激活细胞内的PKC-p38 MAPK信号通路,并介导EBV转录激活因子BZLF-1的转录表达。进一步研究发现虫草素和阿霉素在磷酸化激活p38 MAPK以及下游转录因子C/EBPβ的过程中具有联合增强作用。结合以往实验和序列分析,发现在BZLF-1的启动子Zp上具有多个C/EBPβ结合位点;通过荧光素酶报告载体实验和siRNA敲低实验研究发现,转录因子C/EBPβ介导BZLF-1转录以及EBV裂解感染激活过程。最后,动物实验表明虫草素和阿霉素联合使用对EBV阳性肿瘤具有明显的治疗作用,不仅可以明显抑制小鼠体内EBV阳性肿瘤的形成和生长,而且虫草素可以明显减缓阿霉素所造成的小鼠体重下降问题。以上研究结果表明,天然小分子化合物虫草素可以诱导EBV裂解感染,而且虫草素和传统化疗药物阿霉素联合使用对于激活EBV裂解感染具有明显的联合增强作用,体内实验证实虫草素和阿霉素联合使用对于EBV阳性肿瘤具有明显的治疗效果,本文同时阐明了虫草素与阿霉素联合使用通过PKC-p38 MAPK-C/EBPβ信号通路激活EBV裂解感染的分子机制。以上研究结果为EBV阳性肿瘤的治疗提供了重要实验依据和临床应用参考。