两栖类动物鳃的发育是一个复杂的过程,包括外鳃期、内鳃期、内鳃退化等阶段。本研究以花背蟾蜍发育过程中的鳃为研究对象,运用石蜡切片、半薄切片、透射电镜、免疫组化等相关技术,研究了花背蟾蜍鳃的发生,发育,退化过程中的形态结构及细胞凋亡的变化规律,探论了细胞凋亡与鳃发育之间的关系。结果表明花背蟾蜍鳃的发生是从胚胎发育第15期鳃原基开始出现,随着发育,鳃原基分化出鳃板,鳃板继续分化出鳃弓,接着由鳃弓分化出外鳃,到胚胎发育20期形成以外鳃为呼吸器官的呼吸系统。外鳃进一步发育,形成了三排指状外鳃,到22-23期,达到发育高峰。到胚胎发育25期,外鳃被鳃盖包在鳃盖腔里面,内鳃开始形成,同时外鳃开始退化消失。内鳃的发育是首先由鳃弓上的突起形成鳃叶,其次鳃叶上出现初级突起,随着进一步发育出现次级突起和三级突起,直到内鳃发育最高峰(胚胎发育的36期)。随后进入变态期,内鳃开始退化,首先是三级突起开始萎缩,其次是次级突起和初级突起,最后是鳃弓,直至鳃弓完全消失,变态完成。电镜结果表明花背蟾蜍外鳃与内鳃具有相同的呼吸上皮,为扁平状,上皮细胞质中富含粗面内质网及空泡和线粒体;气血屏障由由单层上皮细胞,内皮细胞以及二者之间的基底膜构成,随着个体的发育,气血屏障逐渐变薄。在电镜下可见外鳃(25期)与内鳃退化时期(37-39期)鳃上的凋亡细胞,鳃细胞凋亡的形态学改变表现为:细胞体积明显缩小,形状改变:细胞胞质空泡化十分显著,胞浆浓缩,胞质减少,细胞质电子密度大,呈深色:胞质内细胞器结构模糊不清,数目明显减少或消失;细胞核凝集,染色质固缩,积聚成致密块,并伴有“凋亡小体”出现。但凋亡细胞出现机率最多的是外鳃与内鳃退化时期,即发育过程中的25期与37、38、39期。TUNEL免疫组化结果表明花背蟾蜍胚胎发育以下阶段都存在细胞阳性反应,但反应程度不同,23、24、27、31、35、36期有少量的细胞呈阳性,而在25、37、38期有大量的细胞呈阳性。表明在花背蟾蜍胚胎鳃的整个发育过程中都存在着细胞凋亡,但只有在外鳃和内鳃退化阶段出现大量的细胞凋亡。说明细胞凋亡是生物体维持机体发育平衡的一种最基本的生物现象。