背景病态窦房结综合征(Sick Sinus Syndrome, SSS)简称病窦综合征或病窦,也称窦房结功能不全(SND),是由窦房结和(或)其临近组织病变引起的窦房结起搏和(或)传导功能障碍,从而产生的多种心律失常和临床症状。病窦以其高发病率、高栓塞率、高致死致残率,成为威胁人类生命健康的重大疾病,病窦临床尚无根治方法,西医主要通过阿托品、氨茶碱等药物提高心率,但副作用明显,不能长期服用。严重者须安装心脏起搏器,但起搏器价格昂贵,并不能降低其死亡率,且存在多种禁忌症和并发症,尚无法普及。生物起搏尚处于动物试验阶段,无法应用于人体,且存在排异反应、伦理等问题。近年来中医药治疗病窦的研究取得了可观成果,且安全性高,适合长期治疗,有良好的发展前景。通阳活血法是国医大师刘志明教授临证70余年治疗病窦的经验精华。刘老认为,病窦最常见的病机是心肾阳虚,寒凝血瘀是最主要的疾病之标,通阳活血是治疗本病的基本大法。刘老由此法独创通阳活方,临床治疗病窦取得了卓著的疗效。目的进一步验证通阳活血方治疗阳虚血瘀证病窦的疗效与安全性,同时从对抗窦房结细胞凋亡、保护窦房结细胞骨架蛋白的角度探讨通阳活血方治疗病窦的细胞生物学机制。为国医大师经验方治疗SSS提供科学依据,为中医药防治SSS提供新的诊疗思路。方法1.临床研究：从中医证候、心率等方面观察通阳活血方治疗SSS的临床疗效和安全性,研究指标包括心悸、胸闷、气短、头晕等临床证候,心率,心率变异性等疗效性指标,同时观察血压、血常规、肝肾功能及不良事件等安全性指标。2.实验研究：采用的单酶解、差速贴壁等方法分离、培养窦房结细胞,并进行形态学和电生理的鉴定。采用缺氧缺糖模拟缺血,恢复糖和氧的供应模拟再灌注的方法造模。采用高、中、低浓度通阳活血方含药血清对各组细胞进行干预,通过MTT比色法、流式细胞术、激光共聚焦显微镜等检测模拟缺血再灌注损伤兔窦房结细胞凋亡情况及细胞骨架蛋白F-actin、Vinculin、β-tubulin和Desmin的形态和平均荧光强度,并观察通阳活血方含药血清对以上指标的影响。结果1.临床研究：共收集较为完整的病历资料43份,患者年龄、病情均符合伦理。无明显不良反应发生,研究过程中多数患者依从性良好,2例脱落,均为患者自行退出。43例治疗前后的证候评分均有不同程度的改善,证候疗效总有效率为95.35%,对中医单项症状如心悸、胸闷、气短、头晕、形寒、乏力、自汗、浮肿等均有所改善(P<0.01)；治疗后静息状态下即刻心率均有所升高,较治疗前有显著差异(P<0.01)。而治疗前后患者血压无明显差异；患者的心率均有不同程度的改善,通过4周的治疗后心率较前明显升高,24小时总心率、平均心率、最快心率、最慢心率较治疗前具有显著差异(P<0.01),Holter心率总有效率72.10%;患者治疗后HRV相关指标(包括SDNN、rMSSD、SDANN、PNN50)均有所下降,有显著差异(P<0.01)；治疗前后血压(包括收缩压和舒张压)、血常规(包括WBC、RBC、HGB、PLT)、肝肾功能(包括BUN、Cr、ALT、AST)等各项指标均无明显变化(P>0.05)。治疗过程中均未发现不良反应。2.实验研究：采用的单酶解、差速贴壁等方法成功分离、培养窦房结细胞,并进行了形态学和电生理的鉴定。采用缺氧缺糖模拟缺血,恢复糖和氧的供应模拟再灌注的方法造模成功。采用高、中、低浓度通阳活血方含药血清对各组细胞进行干预,MTT检测结果中,模型组与空白对照组存活细胞量有明显差异(p<0.01),表明造摸方法可行；空白血清组与模型组无明显差异(p>0.05),显示兔血清对实验结构无干扰。含药血清高、中、低剂量组存活细胞量都明显高于模型组(p<0.01),且呈浓度依赖的量效关系,表明药物浓度选取有效可行。流式细胞检测结果显示,模型组与空白血清组细胞大量凋亡,含药血清高、中剂量组凋亡率明显低于模型组(p<0.05)。表明通阳活血方含药血清能对抗缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡。激光共聚焦显微镜观测结果显示,模型组细胞骨架蛋白F-actin、 Vinculin、β-tubulin、Desmin裂解明显,平均荧光强度明显低于空白对照组(p<0.01),含药血清高、中、剂量组细胞骨架形态均较为完整,且平均荧光强度明显高于模型组(p<0.01),表明通阳活血方能保护缺血再灌注所致的细胞骨架损伤。结论1.国医大师刘志明教授原创的通阳活血方能显著地改善病态窦房结综合征心肾阳虚证患者临床证候,提高患者的心率,同时能够降低心率变异性相关指标,相对提高交感神经张力,减小迷走神经张力,有效改善自主神经功能,临床疗效满意。同时对患者的血压水平、肝肾功能等无不良影响,安全性好。表明通阳活血方治疗病态窦房结综合征安全有效。2.通阳活血方含药血清能提高缺血再灌注损伤窦房结细胞的活力,对抗细胞凋亡,保护窦房结细胞骨架蛋白F-actin、Vinculin、β-tubulin、Desmin,从而保护细胞结构和功能,这可能是通阳活血方治疗病窦的机制之一。