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目的:探讨雌激素抑制心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFS)增殖是否与中电导钙激活钾通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channel,KCa3.1)有关。方法:1、新生小鼠心脏成纤维细胞的培养与鉴定:取新生雄性小鼠,经手术取其心脏心室,酶消化差速贴壁法培养,特异性抗体荧光免疫法鉴别CFS。2、心脏成纤维细胞增殖模型的建立:培养的CFS加入以下浓度的AngII:10-4、10-5、10-6、10-7、10-8mol/L分别培养12h、24h、48h、72h后,并以不加AngII作对照组,使用MTT法检测CFS增殖情况。3、观察雌二醇(estradiol,E2)和KCa3.1通道特异性阻断剂TRAM-34对小鼠CFS增殖活性的影响:(1)对照组:AngII:10-6mol/L,无E2,无TRAM-34;(2)AngII+E2组:先使用浓度为10-6mol/L的AngII预处理30min后,分别加入10-5、10-6、10-7、10-8mol/L浓度的E2;(3)AngII+TRAM-34组:先使用浓度为10-6mol/L的AngII预处理30min后,分别加入10-4、10-5、10-6、10-7mol/L浓度的TRAM-34;各组均处理24、48、72小时后,使用MTT法检测细胞增殖情况。4、普通PCR检测KCa3.1mRNA表达情况,ELISA法检测p38-MAPK磷酸化水平:CFS预先用AngII(10-6mol/L)处理30min后备用,实验分组为:(1)正常对照组(无AngII,无E2,无TRAM-34);(2)AngII组;(3)AngII+E2×10-5mol/L组;(4)AngII+TRAM-34×10-4mol/L组孵育48h,MTT检测细胞增殖活性,普通PCR检测细胞KCa3.1mRNA的表达,ELISA检测细胞p38-MAPK的磷酸化水平。结果:AngII可诱导小鼠CFS增殖,并具有时间及浓度依赖性,与空白组对照,10-6、10-5、10-4mol/L浓度AngII增殖效果显著,具有统计学意义(P<0.01);10-5、10-4mol/L浓度增殖效果与10-6mol/L比较无显著差异(P>0.05),故选用10-6mol/L作为增殖模型的浓度;与AngII组比较,E2和TRAM-34对小鼠CFS的增殖活性抑制作用明显,并具有浓度及时间依赖性;10-5mol/LE2与10-4mol/LTRAM-34干预48h对CFS增殖作用的影响无显著差异(P>0.05)。与正常对照组比较,AngⅡ组可显著提高KCa3.1mRNA表达,具有统计学意义(P<0.01);与正常对照组比较,AngⅡ+E2×10-5 mol/L组和AngⅡ+TRAM-34×10-4mol/L组,均可显著抑制KCa3.1mRNA表达,并具有统计学意义(P<0.05);与AngⅡ组比较,AngⅡ+E2×10-5 mol/L组和AngⅡ+TRAM-34×10-4mol/L组,均可显著抑制KCa3.1mRNA表达,并具有统计学意义(P<0.01);AngⅡ+E2×10-5 mol/L组和AngⅡ+TRAM-34×10-4mol/L组比较无显著差异(P>0.05)。正常对照组比较,AngⅡ能够显著提高p38-MAPK磷酸化水平,具有统计学意义(P<0.01);与AngⅡ组比较,AngII+E2×10-5mol/L组能够显著降低p38-MAPK磷酸化水平,具有统计学意义(P<0.01);与AngⅡ组比较,AngII+TRAM-34×10-4mol/L组对p38-MAPK磷酸化水平影响不显著(P>0.05);AngII+E2×10-5mol/L组与AngII+TRAM-34×10-4mol/L组间有显著差异,具有统计学意义(P<0.01)。结论:AngII可诱导小鼠CFS增殖;E2与TRAM-34均能抑制CFS增殖,10-5mol/LE2与10-4mol/LTRAM-34对CFS增殖作用的影响无显著差异;雌激素抑制心脏成纤维细胞增殖的机制可能是降低p38-MAPK磷酸化水平,从而抑制KCa3.1mRNA表达。