三叉神经节卫星胶质细胞P2X7受体在偏头痛大鼠模型中作用的研究

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目的通过大鼠腹腔注射硝酸甘油(GTN)建立急性偏头痛模型。造模成功后使用Western blot技术检测大鼠三叉神经节上P2X7受体和c-fos的表达变化;使用免疫荧光检测卫星胶质细胞上P2X7受体和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况。最后通过腹腔注射P2X7受体抑制剂亮蓝(BBG)观察其对三叉神经脊束核c-fos和降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响,来探究P2X7受体是否参与偏头痛的发病及其可能的机制。材料和方法1.Sprague-Dawley大鼠10只,随机分为2组:腹腔注射生理盐水组(n=5,2ml/Kg)和腹腔注射GTN组(n=5,10mg/Kg)。给药前使用Von Frey测痛仪测量各组大鼠后爪上的基础痛觉阈值,之后分别在给药第1、2和4小时时再次测量大鼠后爪上的痛觉阈值。使用免疫荧光观察大鼠三叉神经节P2X7受体和GFAP的表达。2.Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组:正常组(n=5)和腹腔注射GTN 1小时组(n=5,10mg/Kg)、腹腔注射GTN 2小时组(n=5,10mg/Kg)和腹腔注射GTN 4小时组(n=5,10mg/Kg)。Western blot技术检测大鼠三叉神经节上P2X7受体和c-fos的表达变化。3.Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组:腹腔注射生理盐水2小时组(n=5,2ml/Kg)、腹腔注射GTN 2小时组(n=5,10mg/Kg)、腹腔注射GTN+生理盐水2小时组(n=5,10mg/Kg,2ml/Kg)和腹腔注射GTN+BBG 2小时组(n=5,10mg/Kg)。使用Western blot技术检测大鼠三叉神经脊束核c-fos和CGRP的表达。结果1.痛觉阈值:腹腔注射GTN后,大鼠后爪上的痛觉阈值开始下降,在第2小时下降最为明显,明显低于生理盐水组(p<0.05)。2.免疫荧光:三叉神经节上的P2X7受体和GFAP共表达。3.Western blot:腹腔注射GTN后,大鼠卫星胶质细胞P2X7受体表达开始下降,在第2小时下降最为明显,明显低于正常组(p<0.05)。而三叉神经节和三叉神经脊束核c-fos和CGRP的表达明显高于正常组(p<0.05)。在使用P2X7受体抑制剂BBG后c-fos和CGRP增加的更加明显(p<0.05)。结论1.P2X7受体特异性表达在大鼠三叉神经节卫星胶质细胞上。2.急性偏头痛大鼠模型三叉神经节P2X7受体表达降低,提示P2X7受体在偏头痛中可能有一定作用。3.急性偏头痛大鼠腹腔注射BBG后,三叉神经脊束核c-fos和CGRP的表达进一步增高,表明卫星胶质细胞P2X7受体在偏头痛中可能具有保护作用。
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