红树莓果中鞣花酸的提取、纯化及抗氧化性和抑菌活性的初步研究

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本研究以红树莓为原料进行鞣花酸的提取、纯化及抗氧化性和抑菌活性的初步研究。建立了高效液相色谱法测定红树莓中的鞣花酸,考察了溶剂提取鞣花酸的最佳工艺条件,并利用高速逆流色谱对其进行了纯化,最后还对红树莓中鞣花酸的抗氧化性和抑菌活性做了研究。结果表明:以鞣花酸为标准品,采用高效液相色谱法测定红树莓中的鞣花酸。鞣花酸的含量在0.322~8.05μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,鞣花酸的平均回收率为93.78%,RSD=0.98%。此法简单、快速、准确,可以用于测定红树莓中鞣花酸的含量。采用溶剂法提取红树莓中的鞣花酸,研究了影响得率的主要因素,采用正交法确定了最佳的提取工艺。结果表明,各因素对鞣花酸提取的影响次序为:丙酮浓度>料液比>提取时间>提取温度,最佳提取条件是:以80%丙酮溶液为提取剂,料液比为1:12(g:mL),在80℃下回流提取90min。在此条件下红树莓中鞣花酸得率为323μg/g。采用高速逆流色谱法,建立了高速逆流色谱分离纯化红树莓果中有效成分鞣花酸的新方法。试验结果表明:两相溶剂系统正丁醇:异丙醇:水(v/v/v)=2:1:3,上相为固定相,下相为流动相,流速为2mL/min,转速为850r/min,可从120g红树莓果中分离得到纯度为81.6%的鞣花酸35.2 mg。利用纯化后的红树莓鞣花酸进行了还原能力的测定、抗猪油试验、清除羟基自由基和抗DPPH氧化试验。结果表明,红树莓中鞣花酸具有较好的还原能力、能有效的抑制猪油的氧化并能有效的清除羟基自由基和DPPH·自由基,具有较好的抗氧化能力。测定分析了红树莓果中鞣花酸提取物对常见微生物的抑菌活性。结果表明,鞣花酸提取物对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌等受试细菌具有较好的抑制作用。鞣花酸提取物对受试霉菌、米曲霉、黑曲霉、以及受试酵母菌抑制作用较弱。
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