已有研究表明肿瘤的发生发展与氧化还原平衡密切相关,近期的研究发现抗氧化剂对肿瘤免疫具有复杂的调控作用。硫氧还蛋白(Trx)是一种分布广泛的抗氧化酶,能够还原蛋白质的半胱氨酸残基,使得巯基和二硫键之间相互转换。调节性T细胞(Treg),也称抑制性T细胞(Suppressor T cell),在体外和体内都显示出很强的免疫抑制活性。虽然Treg与恶性肿瘤免疫抑制的关系还在研究之中,但小鼠体内抑制Treg的研究结果表明机体抗肿瘤免疫能力得到了显著提升。本项目重点研究硫氧还蛋白在黑色素瘤中对Treg的调节作用及对肿瘤免疫应答的影响。主要内容分为三个部分:第一部分收集黑色素瘤肿瘤样品,通过免疫组化方法确定Trx在肿瘤样品中的表达变化;通过流式细胞分选技术,检测Treg细胞在黑色素瘤组织中的浸润情况;第二部分通过构建Trx过表达和敲低的黑色素瘤细胞系,在荷瘤小鼠体内研究Trx对Treg细胞浸润的影响;第三部分使用重组的Trx蛋白和Trx中和抗体,研究Trx促进Treg细胞浸润的机制。实验结果如下:1.Trx在人类黑色素瘤组织中高表达,并与肿瘤的分级分期呈正相关性;2.体外培养的黑素瘤细胞可以分泌大量的Trx蛋白;3.Trx可以促进Treg细胞在黑色素瘤中的浸润,从而提高肿瘤的免疫抑制能力;4.在体外细胞和体内荷瘤鼠实验中,Trx可以提高Treg的迁移能力;5.在体外细胞和体内荷瘤鼠实验中,Trx可以促进效应性T细胞向Treg细胞转化;6.在体外细胞和体内荷瘤鼠实验中,Trx可以提高Treg细胞的抗凋亡能力;7.Trx抗体可以抑制Treg细胞在肿瘤局部的浸润,增强抗肿瘤免疫应答;8.Trx抗体可以降低黑色素瘤的生长速率和转移速率。综上所述,本研究明确了Trx在黑色素瘤中对Treg浸润的调节作用,初步分析了Trx促进Treg细胞浸润的机理,明确了Trx抗体在黑色素瘤免疫应答过程中潜在应用价值,为黑色素瘤的治疗提供了新的潜在药物靶点。