背景：不孕不育严重困扰着人类生殖健康，不育(孕)约占育龄夫妇的10％～15％，其中男性因素约占50％。近一百年来，男性精子不论数量还是质量都出现了明显下降的趋势。环境因素被视为这种“下降”的主要原因之一。越来越多流行病学证据显示“白色污染”是导致这一改变的重要因素之一。其中，邻苯二甲酸二乙基己酯（Di(2-Ethylhexyl)Phthalate，DEHP）使用较多，危害较大，危害作用尤为明显。DEHP属于邻苯二甲酸酯类化合物（PAEs）中重要的一员，作为塑料增塑剂在各个行业中大使用。尤其在食品包装材料、医用材料中的应用，由于可通过消化道或循环系统与人体接触，故危害更大。DEHP同时也是多种化学工业产品的重要成分，通过各种途径对环境造成严重的“白色污染”。相关资料显示：成人男性不育患者尿中DEHP代谢产物浓度高于正常对照。本课题组前期研究也证实DEHP可导致雄性大鼠生精功能障碍。　　DEHP作为环境污染物，已被证实与男性不育相关，但其具体机制尚未完全明确，因此本课题拟通过制备DEHP诱发的SD大鼠生精功能障碍模型，探讨其致病机制及干预措施，为治疗及预防男性不育，提高人口素质提供科学依据。　　目的：探讨DEHP导致生精功能障碍的病理学分子机制，并探索其干预措施。　　方法：　　（1）建立DEHP诱导大鼠不育模型，明确DEHP与生精功能障碍的量效关系；　　（2）免疫组织化学方法评估大鼠生精细胞凋亡水平；　　（3）监测DEHP作用于大鼠及5-aza-CdR干预后大鼠基因组DNA甲基化状态、Bcl-2基因启动子甲基化修饰及基因表达情况，明确DNA甲基化修饰在DEHP诱导生精细胞凋亡发生过程中的调控作用；　　（4）以叶酸作为单独干预剂处理后，检测生精功能、生精细胞凋亡水平以及Bcl-2基因启动子甲基化水平。　　结果：　　1.DEHP成功诱导出SD大鼠生精功能障碍模型，表现为睾丸体积变小，质地变软；组织学变现为曲细精管变细，附睾精子计数降低；流式细胞仪检测发现生精细胞凋亡增加。　　2.免疫组化、RT-PCR及Western-blot均显示在实验组大鼠睾丸组织中，BaxmRNA与蛋白表达显著高于正常对照组而Bcl-2的相应指标则低于正常对照组。　　3.甲基化特异性PCR结果提示实验组大鼠睾丸组织Bcl-2第一外显子甲基化水平较正常组降低，整体甲基化水平也较正常组降低。　　4.用叶酸进行干预后，免疫组织化学及Western-blot检测到大鼠睾丸Bcl-2的表达较实验组升高。　　结论：　　DEHP诱导SD大鼠生精功能障碍可能与Bax/Bcl-2基因表达水平失衡有关。其中实验组大鼠睾丸Bcl-2基因第一外显子甲基化水平升高及整体甲基化水平升高可能起重要作用。叶酸对DEHP导致的生精细胞凋亡有干预作用。