心血管疾病严重危害人类的健康。心血管发育是一个复杂的过程,受一系列转录因子的精确调控。从分子水平上系统地研究控制心血管发育及相关基因的相互调控关系,有助于人们深入认识心血管疾病发生的机制。果蝇CG8419基因是是本室克隆鉴定的人类Trim45基因的同源基因,该基因在进化上具高度保守性。本室前期利用果蝇模型进行研究的结果表明,CG8419可能与果蝇血细胞形成有关。本文研究前期通过酵母双杂交实验筛选到的CG8419基因的2个候选相互作用蛋白CG9090及mrj。本研究首先将果蝇CG8419, CG9090和mrj基因的开放阅读框克隆到pMD18一T载体中,经酶切和测序证实后,再分别构建成真核表达质粒pCMV-tag2B-CG8419, pCMV-myc-CG9090和pCDNA3.1B-mrj,分别转染HEK293细胞,通过免疫共沉淀技术研究这3个基因的相互作用情况。结果表明,全长的CG8419基因与CG9090, CG8419与mrj均具有相互作用。为了进一步研究CG8419基因的具体相互作用位点,将CG8419亚克隆成质粒pCMV-tag2B-Ring, pCMV-tag2B-RB2, pCMV-tag2B-RB 1 pCMV-tag2B-B2F, pCMV-tag2B-B1F和pCMV-tag2B-FLMN。CG8419亚克隆与CG9090及mrj的免疫共沉淀结果表明,CG8419通过B-BOX结构域与CG9090及mrj相互结合,此外Ring结构域也具有一定的作用。CG9090亚克隆片段与CG8419的免疫共沉淀实验表明,CG9090通过Pfam:Mito_carr结构域与CG8419发生相互作用。Mrj亚克隆片段与CG8419免疫共沉淀实验表明,mrj通过DnaJ结构域与CG8419发生相互作用。综上所述,CG8419主要通过B-BOX结构域与CG9090和mrj相互作用,CG9090通过Pfam:Mito_carr结构域与CG8419相互作用,mrj通过DnaJ结构域与CG8419发生相互作用。该研究为进一步研究CG8419在果蝇血细胞形成中的调控机制打下了基础。