多糖作为一类天然高分子化合物,它是由醛糖或酮糖通过糖苷键连接在一起的多聚物。多糖具有多种生物学活性,它与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖在细胞间的识别、分泌以及蛋白质的加工和转移等方面都起着至关重要的作用；此外,它还能影响细胞的增殖和分化、调节细胞的生长与衰老,具有良好的抗氧化活性。近年来,真菌多糖的抗肿瘤作用引起了人们广泛的注意,除了可以通过增强宿主免疫功能而发挥抗肿瘤作用外,多糖还能通过直接作用于肿瘤细胞或诱导肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。但一种真菌多糖通常只对某-种生理效应有作用或效果不明显,许多实验证明,一些真菌多糖复合使用时,呈现协同作用,效果比单味多糖更显著。对真菌多糖的研究逐渐向多种多糖复合的方向发展,本研究在前人工作的基础上,采用体外细胞实验及小鼠模型实验来研究姬松茸、灰树花、云芝、香菇四种多糖复合使用时其抗氧化、抗肿瘤及免疫调节活性的变化,为多糖复合应用的进一步研究及临床应用提供一定的实验依据。目的1.研究姬松茸、香菇、灰树花、云芝四种多糖复合使用与各多糖单独使用,其体内抗氧化、抗肿瘤及免疫增强活性的变化,为多糖复合应用的进一步研究及临床治疗提供一定的实验依据。2.研究姬松茸、香菇、灰树花、云芝四种多糖复合使用与各单味多糖体外抗肿瘤及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,探讨复合多糖体外抑制肿瘤细胞生长的用量。方法1.采用超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒及丙二醛(MDA)试剂盒测定复合多糖与各单味多糖对小鼠体内抗氧化活性的影响。2.采用体外细胞培养的方法,探讨复合多糖与各单味多糖对SMMC-7721人肝癌细胞生长的抑制作用,以及对正常小鼠和S-180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖实验的影响。3.采用小鼠体内实验,研究复合多糖与各单味多糖对小鼠免疫功能调节的作用,及对实体肿瘤生长的抑制作用。4.实验数据用x±S表示,采用SPSS12.0软件进行统计分析。各组之间的总差异采用方差分析,多组样本之间的两两比较采用SNK法分析,检验水准a=0.05。结果1.各多糖组血清T-SOD活性均高于空白对照组(P<0.01),MDA含量均低于空白对照组(P<0.01)；复合多糖中剂量组血清T-SOD活性高于各单味多糖组(P<0.01),MDA含量低于各单味多糖组(P<0.01)。2.体外细胞培养实验中,复合多糖在125-500μg/ml浓度范围内随浓度的升高其肿瘤细胞生长抑制率随之升高,浓度升高至1000μg/ml时,其肿瘤细胞生长抑制率反而下降(P<0.05)。3.小鼠脾淋巴细胞增殖实验中,各多糖组均能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.01)；正常小鼠与荷瘤小鼠相同组间两两比较,复合多糖高剂量组,灰树花多糖组和云芝多糖组荷瘤小鼠的刺激指数高于正常小鼠(P<0.01),其他各组差异均不具有统计学意义；复合多糖中剂量组的淋巴细胞刺激指数低于各单味多糖组(P<0.01)。4.碳粒廓清实验中,复合多糖中剂量组的校正吞噬指数α高于姬松茸、云芝、香菇多糖组(P<0.05)。5.荷瘤小鼠模型实验中,各多糖组抑瘤率均低于环磷酰胺组(P<0.01)；复合多糖中剂量组的抑瘤率低于姬松茸、云芝、灰树花多糖组(P<0.05)；复合多糖中剂量组胸腺指数高于各单味多糖组(P<0.01),脾指数各组间差异无统计学意义。结论1.姬松茸、灰树花、云芝、香菇四种多糖复合使用时,可以显著提高其体内抗氧化活性,提高其体外对SMMC-7721人肝癌细胞的抑制作用,更有效的激活小鼠单核巨噬细胞系统,保护荷瘤小鼠的T淋巴细胞,防止胸腺萎缩,提高机体免疫力。2.在250μg/ml浓度时,四种多糖复合使用不能更好的刺激体外小鼠脾淋巴细胞增殖；0.250 g·kg-1·d-1剂量时,复合多糖抑制荷瘤小鼠肿瘤生长的效果不如姬松茸、云芝和灰树花多糖。3.多糖复合使用在机体抗氧化、增强免疫力方面有着更好的应用前景,在肿瘤治疗方面,多糖还暂时不能替代传统药物的治疗,可以作为辅助治疗手段,改善患者免疫状态；不同的肿瘤,应慎重选择不同的多糖,多糖的使用浓度对肿瘤生长的影响也很重要。