JWA是受维甲酸（RA）、13顺-维甲酸（13-cRA）和佛波酯（TPA）等调控的新的细胞骨架相关基因。我们以前的研究发现，JWA与细胞分化和凋亡相关并可能与白血病有关联。 为了探讨JWA与急性早幼粒细胞性白血病（APL）细胞分化和凋亡的关系，分别用1 μM ATRA、1 μM 4HPR、0.1 μM TPA和1 μMAs₂O₃，处理NB4细胞，用Western blot和RT-RCR分别检测JWA在蛋白和mRNA水平的表达，同时检测细胞周期和CD11b、CD33细胞表面抗原分析细胞分化和凋亡。结果表明1) ATRA和As₂O₃分别诱导细胞分化和凋亡，而4HPR和TJPA对NB4细胞分化和凋亡则有双重诱导作用；2) 在诱导细胞分化和凋亡过程中，JWA的表达水平均上调；3) 用JWA反义核酸处理NB4细胞后，TPA诱导其分化和凋亡的能力受到明显抑制。以上结果提示JWA可能参与ATRA、4HPR、TPA和As₂O₃诱导APL细胞分化和凋亡的共同通路，而TPA对NB4的作用可能是通过由JWA参与的直接和间接两种途径买现的。 在对APL（M3）原代细胞的研究中除观察到与NB4细胞相似的JWA变化外，还发现1) 药物处理初发病人原代白血病细胞，只 南京医科大学硕士学位论文有T助处理后J狐蛋白表达有明显变化，而病人经AT RA治疗后，ATRA和AS。O。也可在体外调节细胞JWA蛋白的表达；2)一特征性的与APL细胞分化和凋亡有关的异常分子量的JWA蛋白门狐－F)。这些结果提示，在APL发生发展过程中Ro的转录和翻译水平分别受到不同的调节，而AT RA作用下的AP L细胞可能改变了其他药物调节J厂拄的信号转导通路。 在研究中还发现HL－60细胞也表达与APL相似的J狐｛蛋白。用 As。O；处理HL＊0细胞后，分别用免疫细胞化学染色和Western blot检测．xxux表达，同时检测caspase习的表达来分析细胞是否发生凋亡。结果表明 1)2 pM AS。O。处理组细胞发生凋亡，JWA蛋白的表达呈剂量依赖性升高；2)细胞发生凋亡时JWA工蛋白表达先稍升高后下降，并与 caspase上蛋白表达变化趋势相似；而 JWAf蛋白表达呈时间依赖性增高。在高浓度组（此时细胞成碎片JWA蛋白失去网络样结构）仅检测到JWAI。以上结果提示yu与caspase的信号调节通路可能相关，而仰八工和J WAWAI的所涉及的信号调节通路可能不尽相同。 为了进一步探讨J狐f产生的结构基础，提取NB4和HL乃0细胞基因组DNA并进行多重PCR扩增，分析比较两种细胞iu及其启动子部位 DNA。结果显示 ii基因组 DNA＋164 hp至＋3 88 hp之间可能有异常，但两种细胞扩增产物并无明显差别。 综上所述，在 APL的发生发展中 ．HM可能起一定作用，JW4可能参与AT RA、4 HPHPR、TPA和尔。O；诱导AP L细胞分化和凋亡的共同信号调节通路，其蛋白表达水平与APL细胞的分化程度和细胞增殖周期相关。TPA可能通过与Jlljvi有关的直接和间接两种途径诱导ML细胞分化和凋亡。J WAWAf与正常分子量的J他蛋白可能涉及不同的信号调节通路