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类风湿性关节炎(RA)是一种慢性炎性的自身免疫性疾病,主要表现为关节滑膜炎及关节病变。病变的炎症部位具有类似肿瘤血管的通透增强与滞留效应(EPR)。脂质体和纳米粒已广泛用于RA的靶向治疗。本课题以他克莫司(FK506)为模型药物,以卵磷脂和大豆磷脂(SPC)为脂质材料,加入适量的胆固醇(Chol)和增溶剂维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)制备FK506脂质体,并以新型两亲性高分子材料聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)为载体制备FK506自组装纳米粒。并研究了两种纳米给药系统的理化性质、稀释稳定性、体外释放及对佐剂性关节炎大鼠的药效学。局部注射缓释给药系统可在患处形成较高的药物浓度,降低全身毒副作用,减少给药次数。本研究以Soluplus为凝胶基质研制一种新型温敏凝胶,并与常用温敏凝胶基质P407对比研究二者的胶凝特性、凝胶黏度,体外释药,体内成形性与滞留及对AIA大鼠的治疗效果。采用薄膜分散超声法制备FK506脂质体,经单因素考察筛选出较优的FK506脂质体由(EPC:SPC):Chol:TPGS摩尔比为55:15:30,药脂比为1:10,EPC:SPC质量比为90:10组成。FK506脂质体包封率为99.1%±0.1%,体均粒径为33.0 nm±0.1 nm,zeta电位-17.7 mV±1.1 mV。体外稀释30倍,泄漏率也仅有2.6%±0.1%,可避免注射至体内因血液稀释引起的药物突释现象。采用透析法考察FK506脂质体在0.5%吐温80(Tween80)-PBS(pH5.0、pH7.4)溶液中体外释药特性,释放48h,FK506累积释放量分别为47.8%±3.7%和41.4%±4.5%,具有缓释效果且无突释现象。乙醇注入法制备FK506自组装纳米粒,经单因素考察筛选出较优的FK506自组装纳米粒由80 mg/mL的载体浓度,3:80的药载比组成。包封率为97.6%±0.5%,体均粒径为88.3 nm±1.3 nm。体外稀释27倍,泄漏率也仅有7.2%±0.2,表明制剂进入体内后药物仍是被包裹于纳米粒中的。采用透析法考察FK506自组装纳米粒的体外释药特性,释放48h,FK506在0.5%Tween80-PBS(pH5.0、pH7.4)溶液中累积释放度分别为54.0%±3.9%和47.9%±2.2%,具有缓释效果且无突释现象。以Soluplus和P407为温敏凝胶基质,胶凝浓度、温度和时间,及凝胶黏度为评价指标比较其胶凝特性;并在此基础上研制FK506-Soluplus(10%和20%)凝胶和FK506-P407(20%)凝胶。结果显示10%~20%的Soluplus和20%的P407具有适宜的胶凝温度和时间,25℃黏度小,方便注射,温度升至37℃时能够迅速胶凝成半固体状,20%Soluplus和P407的胶凝温度分别为33.6℃和26.4℃。皮下注射给予小鼠的注射局部凝胶成形、滞留和体内外药物缓释结果显示,Soluplus更适于局部长效缓释给药。建立AIA模型,以足肿胀度和体重等为评价指标,研究各FK506制剂对AIA大鼠的药效学,同时对比研究尾静脉连续给药和局部单次皮下给药的治疗效果。连续给药期间,两种纳米给药系统均可有效抑制大鼠的足肿胀度,但是大鼠食欲受影响,体重降低。给药结束后,体重开始增长,但FK506脂质体足肿胀度出现反弹至最终d21的111%±19%,FK506自组装纳米粒为84%±7%;单次局部皮下给药的3种FK506温敏凝胶也同样显示减轻足肿胀的疗效,同时体重缓慢持续增长。注射FK506-20%P407凝胶和FK506-10%Soluplus凝胶都在4天内有效抑制大鼠足肿胀度,注射FK506-20%Soluplus凝胶后10天内大鼠足肿胀度持续降低。10%、20%Soluplus和20%P407载药凝胶组最终的足肿胀度分别为83%±7%、83%±10%和100%±7%。