柯里拉京对放射性脑损伤保护作用的体内机制研究

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【目的】研究中药柯里拉京对放射性脑损伤的保护机制。  【方法】将大约6-8周龄大小的C57BL/6J在武汉大学动物中心购买的小鼠随机分成6组:(1)阴性对照组(Cori):单纯柯里拉京腹腔注射(30 mg/kg)2周;(2)完全空白对照组(Control):腹腔注射生理盐水(20mg/kg)2周;(3)单纯照射组(RT):全脑放疗10 Gy;(4)放疗+柯里拉京低剂量治疗组腹腔注射(15mg/kg):全脑10 Gy放疗后柯里拉京腹腔注射(15mg/kg)2周;(5)放疗+柯里拉京高剂量治疗组腹腔注射(30mg/kg):全脑10 Gy放疗后柯里拉京(30mg/kg)2周;(6)阳性对照组(RT+Dex):全脑10 Gy放疗后地塞米松腹腔注射(5mg/kg)2周。观察柯里拉京对小鼠放射性脑损伤后的一般情况与各组的放射性脑损伤后约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的生存率的影响;Morris水迷宫检测柯里拉京对放射性脑损伤后各组约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠认知功能的影响;HE染色与免疫组化观察海马区神经细胞变化;伊文思蓝与电镜观察血脑屏障功能与结构的改变;双重组织免疫荧光显示各组约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的海马区小胶质细胞的激活与炎症因子的表达;Real-time PCR检测放射性性脑损伤后炎症因子表达水平;免疫荧光检测急性放射性脑损伤后各组约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的海马区的小胶质细胞与各组约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的海马区的炎症因子表达水平;Western blot检测各组p65,stat3与炎症因子TNF-α,IL-1β蛋白表达水平。  【结果】柯里拉京可以改善小鼠放射性脑损伤后一般情况,提高放射性脑损伤后小鼠生存率;Morris水迷宫实验显示柯里拉京可以改善放射性脑损伤小鼠模型的认知功能障碍和学习记忆能力;脑组织病理学显示柯里拉京改善放疗后急性期脑组织间质水肿,炎性细胞浸润,并抑制海马区神经细胞变性、坏死与凋亡;伊文思蓝染色与电镜观察显示柯里拉京可以降低放射性脑损伤模型血脑屏障的通透性;双重组织免疫荧光显示放疗后海马区小胶质细胞的激活并表达炎症因子,柯里拉京可以抑制放疗海马区小胶质细胞激活及其炎症因子的表达;PCR显示柯里拉京降低放射性脑损伤模型炎症因子TNF-α与IL-1β的表达水平;Western blot显示柯里拉京可以显著抑制放射性脑损伤后p65胞浆胞核转移,并下调炎症因子蛋白的表达,上调stat3的蛋白表达水平。  【结论】柯里拉京可能通过stat3/NF-κB信号转导途径,抑制各组约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的海马区的小胶质细胞激活,进而抑制约6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的海马区的炎症因子TNF-α与IL-1β释放,从而对6-8周龄大小的C57BL/6J小鼠的放射性脑损伤发挥其保护作用。
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