【摘 要】
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目的:结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）目前仍是一种危害极大的恶性肿瘤,发病率和致死率都在恶性肿瘤中排前三位。研究针对结直肠癌的特异性诊断与治疗肿瘤标志物,是很有意义的。本研究主要研究INHBA和COL11A1在结直肠癌中表达情况和生物学功能,其次研究它们发挥这些功能的具体生物学机制以及这两个蛋白之间的相互作用关系。最后阐明其共同作用在结直肠癌中的更广泛的意义。方法:1、生物信
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目的:结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）目前仍是一种危害极大的恶性肿瘤,发病率和致死率都在恶性肿瘤中排前三位。研究针对结直肠癌的特异性诊断与治疗肿瘤标志物,是很有意义的。本研究主要研究INHBA和COL11A1在结直肠癌中表达情况和生物学功能,其次研究它们发挥这些功能的具体生物学机制以及这两个蛋白之间的相互作用关系。最后阐明其共同作用在结直肠癌中的更广泛的意义。方法:1、生物信息学分析联合免疫蛋白印迹法分析INHBA在结直肠癌中的表达情况。2、通过转染si RNA沉默INHBA蛋白的表达,然后观察结直肠癌细胞的生物学功能,包括细胞增殖、侵袭和迁移的变化。3、生物信息学共表达分析筛选出在结直肠癌中与INHBA表达趋势最一致的蛋白质,然后分析该蛋白的表达情况以及对结直肠癌细胞生物学功能的影响。4、通过Co-IP以及细胞转染技术,验证INHBA与另一蛋白的结合情况,同时验证它们之间的上下游调控关系,最后验证这两个蛋白对PI3K/AKT/m TOR通路的影响。结果:1、INHBA蛋白质在结直肠癌细胞中高表达。2、沉默INHBA蛋白表达后,结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力减弱。3、基因共表达分析表明INHBA与COL11A1的表达量存在显著的正相关关系。并且COL11A1在结直肠癌中也显著高表达,沉默COL11A1之后发现结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力也相应减弱。4、Co-IP结果显示INHBA与COL11A1存在结合关系,但是转染后分析却发现这两个蛋白并不存在上下游调控关系。此外我们还发现,同时沉默INHBA和COL11A1的蛋白表达,结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力比单一沉默单个基因弱,表明这两个蛋白在结直肠癌细胞中产生协同作用,其高表达共同促进结直肠癌细胞的生长和转移。结论:INHBA与COL11A1在结直肠癌细胞中均高表达,他们存在结合关系但是不属于上下游调控关系。在结直肠癌中其高表达共同通过激活PI3K/AKT/m TOR通路从而促进结直肠癌增殖侵袭和迁移能力。这为结直肠癌的特异性诊断和靶向治疗药物的开发提供了基础,这些潜在能力需要更多分子生物学实验和临床实验验证。
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