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目的:微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在肿瘤的发生发展过程中扮演重要的角色。现有研究证实miR-142-3p参与多种肿瘤的恶性进展,但是其在乳腺癌中的作用机制尚不清楚。本研究拟通过检测miR-142-3p在乳腺癌中的表达水平和探讨其生物学功能,初步揭示miR-142-3p在乳腺癌发生发展中的分子机制,为乳腺癌的临床治疗提供一个新的靶点。方法:1、收集6例乳腺癌患者的癌组织及其配对癌旁组织标本、购买乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3及乳腺正常上皮细胞MCF-10A,运用实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)分别检测组织样本和细胞系中的miR-142-3p的表达水平。2、选择表达降低的两株乳腺癌细胞系进行后续生物学功能实验,将miR-142-3p mimic转染到乳腺癌细胞中使miR-142-3p过表达,然后进行CCK-8、克隆形成实验、细胞凋亡实验、划痕实验、侵袭实验和小管形成实验。3、利用在线分析工具(TargetScan、DIANA tools、miRPathDB和PicTardatabases)预测miR-142-3p潜在的下游靶基因,取交集并进行功能(GO)和通路(Pathway)的富集分析挑选出miR-142-3p的靶基因并利用荧光素酶报告基因验证。靶基因的表达水平采用蛋白免疫印迹和免疫组化的方法进行检测。4、利用Kaplan-Meier plotter数据库评估miR-142-3p在乳腺癌患者中的预后情况,同时运用Oncomine和PROGgene数据库分别分析靶基因在乳腺癌组织中的表达水平及其与乳腺癌患者预后的关系。5、构建裸鼠移植瘤模型,在动物体内观察miR-142-3p发挥的生物学作用。结果:1、与癌旁组织相比,miR-142-3p在乳腺癌组织中的表达水平是降低的(P<0.05);同样与乳腺正常上皮细胞相比,乳腺癌细胞系中miR-142-3p的表达水平亦显著降低(P<0.05)。2、乳腺癌细胞过表达miR-142-3p后,其生物学行为增殖、迁移、侵袭和血管形成能力均受到抑制,此外体内实验亦显示小鼠体内肿瘤的生长受到抑制。3、生物信息学分析显示Ras相关的C3肉毒素底物1(RAC1)是miR-142-3p的一个下游靶基因,并通过荧光素酶报告基因实验得到验证。检测发现,与正常组织和乳腺正常上皮细胞相比,RAC1在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中显著高表达,并且高表达RAC1患者预后较差(P=0.013)。4、MiR-142-3p过表达能够抑制RAC1蛋白表达水平并且抑制间质上皮转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白水平和磷酸化PAK1的活性,而RAC1过表达能够逆转miR-142-3p的抑癌作用。结论:我们的发现显示miR-142-3p在乳腺癌中可以通过靶向调控RAC1/PAK1信号通路发挥肿瘤抑制作用,表明miR-142-3p有可能是治疗乳腺癌的一个潜在靶点。