基于金属毛细管的蛋白质与DNA荧光检测

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微流控传感器是一种非常重要的生化分析工具,利用微流控传感器对液体中的痕量物质进行探测,在生物医学、环保监测、以及疾病检测领域中具有重要意义。蛋白质和DNA在人体中具有重要作用,一些疾病(如乙肝、肿瘤、肾炎等)会导致蛋白质或DNA的含量异常,因此这两种物质的痕量检测有着重要的意义。本文对蛋白质和DNA检测方法进行了相关调研,比较各种检测方法的优缺点,选取合适方法,基于金属毛细管对牛血清蛋白和小牛胸腺DNA进行荧光检测。本文基于检测原理搭建测试系统,设计实验方案。对仪器噪声、仪器左右管路状态差异、浓度污染与仪器清理能力等方面进行了测试,最终证明仪器自身稳定可靠。还对流速模式进行测试和对比,确定合适流速模式和合适测试周期。基于稳定的测试系统,本文对牛血清蛋白含量和小牛胸腺DNA含量进行测试。在牛血清蛋白含量测试中,主要研究了荧光探针罗丹明B浓度对测试的影响以及激发光强度对测试的影响,确定了最佳测试条件。还对体系中存在的干扰因素进行了测试分析,干扰因素主要包括BSA样品自身干扰、NaCl干扰和热变性干扰。通过实验,最终确定了在合适条件下,检测极限可达1×10-12mol/L,线性检测区间为1×10-9mol/L1×10-12mol/L。在小牛胸腺DNA含量测试中,研究了荧光探针罗丹明B浓度对测试的影响,确定了检测极限(1×10-12g/mL)以及线性检测区间(分别为1×10-6g/mL1×10-8g/mL、1×10-9g/mL1×10-12g/mL)。基于热变性测试证明了热变性对罗丹明B和DNA的结合具有一定影响。本文通过对蛋白质和DNA的痕量检测,证明该检测系统在生物检测领域有较强应用价值,从而进一步证明金属毛细管性能较优越,在物质痕量检测领域具有很好的应用前景。
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