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弧菌疾病被认为是目前虾类养殖的关键限制因素之一,弧菌病导致养殖虾产量大大降低,损失量约占世界水产养殖总损失量的25%,这给商业养殖者造成十分巨大的经济损失。另外由于抗生素药品滥用导致的食品安全问题日益突出安稳以及国家无抗养殖政策的推广,饲料生物添加剂的开发成为了热点。益生菌因其具有改变肠道菌群的平衡,抑制病原细菌的生长,促进良好消化,降低过敏原的作用以及增强免疫功能已作为饲料生物添加剂被广泛开发。研究表明,复合添加通常能够达到作用互补或增强的效果,同时内源益生菌较外源益生菌对宿主虾体的作用更加温和,适应性更好。本研究从南美白对虾以及罗氏沼虾的肠道中共分离得到26株乳酸菌菌株以及12株芽孢杆菌菌株,其中对乳酸菌菌株进行了抑菌性和粘附性的测定,对芽孢杆菌进行相关水解酶酶活的测定。实验结果显示,6-24同时表现出较高的抑菌活性和粘附性,B9表现出良好的产酶能力,其中蛋白酶活性较为突出。对上述两株菌株进行16S r DNA分子鉴定以及生理生化鉴定,鉴定结果显示这两株菌株分别是坚忍肠球菌6-24（Enterococcus durans 6-24）以及枯草芽孢杆菌B9（Bacillus subtilis B9）。后续通过冷冻干燥将6-24与B9制成微生态菌粉,两株菌均以1×107 cfu·kg-1添加到饲料并进行为期4周的投喂实验后,本研究测定了罗氏沼虾的总血球细胞,酚氧化酶原系统（pro PO）,抗氧化系统以及溶菌酶变化情况。研究结果显示,罗氏沼虾投喂含有6-24和B9的饲料后,血淋巴中总血球细胞数量（total haemocyte count）显著提高（p<0.05）,酚氧化酶（phenol oxidase）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase）以及溶菌酶（lysozyme）的活性同时也有所提高（p<0.05）,其中总血球细胞数量上升96.54%,酚氧化酶上升48.24%,超氧化歧化酶上升4.42%,溶菌酶上升198.00%。罗氏沼虾肠道消化酶的影响实验显示,添加混合益生菌的实验组虾肠道消化酶（淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶）的活性与对照组相比有显著提高（p<0.05）,其中淀粉酶和脂肪酶活力分别上升48.63%和44.9%蛋白酶活力更是上升84.80%。研究还发现,饲喂坚忍肠球菌6-24和枯草芽孢杆菌B9后,罗氏沼虾肠道中可培养弧菌数量下降59.76%（p<0.05）。最后,罗氏沼虾的生长状况测定结果表明,6-24和B9虽然能够改善罗氏沼虾的生长状况但是效果并不显著（p>0.05）,研究结果表明,坚忍肠球菌6-24与枯草芽孢杆菌B9能在一定程度上改善罗氏沼虾的肠道环境和免疫水平,具有虾饲用益生菌开发的潜力。溶菌酶目前广泛分布于动物,植物和微生物中,是生物体先天性免疫系统的重要物质。同时溶菌酶具有无毒,耐热性高等特点,因此它作为一种应用前景广阔的饲料生物添加剂被广泛地应用在养殖业当中,来改善养殖动物的生长性能和免疫状态。另外,大部分研究表明许多无脊椎动物的免疫参数存在性别差异,雌性个体的免疫参数会高于雄性个体的免疫参数。本研究探究了溶菌酶制剂对不同性别的罗氏沼虾相关系数的影响,往饲料添加270000 U·kg-1溶菌酶并对罗氏沼虾进行为期4周的投喂实验。生长性能结果显示,与对照组相比雌性群体的增重率提高了66.24%（p<0.05）,比生长率提高了50.03%（p<0.05）,饲料转化率降低了40.13%（p<0.05）,但是雄性群体相对于对照组有所提升生长状况但是效果并不显著（p>0.05）。研究还发现喂养了蛋清溶菌酶后雌性与雄性群体的免疫参数均有显着改善（p<0.05）。其中雌性群体的总血球细胞数量上升了82.57%,酚氧化酶活力上升90.75%,溶菌酶活力上升216.77%;雄性群体的总血球细胞数量76.92%,酚氧化酶活力上升90.56%,溶菌酶活力上升126.33%,TF比CF提高了与对照组相比,TM和TF的PO活性分别增加了90.56%和90.75%,有趣的是,我们发现饲喂蛋清溶菌酶后,雄性种群的SOD活性水平倾向于与雌性种群的SOD活性水平一致,据推测,溶菌酶可以促进男性个体中的SOD表达。最后,罗氏沼虾肠道消化酶的影响实验显示蛋清溶菌酶能够显著改善罗氏沼虾肠道脂肪酶的活性（p<0.05）,雌性群体和雄性群体分别提高了111.26%和600.98%。结果表明,蛋清溶菌酶可在体内对罗氏沼虾产生免疫刺激反应,进而改善免疫水平,生长状态和肠道环境。