急性淋巴细胞白血病微小残留病的动态监测

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研究目的:建立免疫球蛋白重链的实时定量检测的方法,并探讨其在急性淋巴细胞白血病微小残留病动态监测的意义。研究方法:采用多重PCR的方法筛选初诊ALL患者的IgH基因单克隆重排,PCR产物测序并经过序列比对,据其连接区序列设计等位基因特异性寡核苷酸(ASO)前向引物,联合下游保守JH引物和保守JH探针,用Taqman探针法RQ-PCR监测.ALL患者治疗过程中MRD的水平,并分析其敏感性和特异性。结果:50例急性淋巴细胞白血病中鉴定出20例单克隆IgH重排,其中可以定量的为11例,定量范围多在10-4以下,敏感性在10-4~10-5之间,仅1例敏感性为10-3,标准曲线的斜率在-3.1~-3.9之间,相关系数均在0.98以上,其背景的非特异性扩增均在低水平,不影响定量。5例MRD水平在10,3以下的病人一直持续缓解,6例MRD水平高于10-3,复发率较高。结论:RQ-PCR方法定量IgH基因重排用于监测急性淋巴细胞白血病病人的MRD水平,具有敏感性高、特异性强、定量结果可靠的优点。数据表明IgH重排水平与,ALL患者预后高度相关。
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