【摘 要】
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目的:观察葡萄糖依赖性肠促胰岛素类似物D-AIa2GIP拮抗骨性关节炎模型鼠细胞外基质代谢异常。方法:将18只雄性SD大鼠(购买于XXXX大学的实验动物中心)共分为3组(假手术组、模型组、模型治疗组),每组6只:模型组、D-AIa2GIP治疗组切断左右后膝关节前交叉韧带、切除内侧半月板;假手术组只切开左右后膝关节囊,不切断前交叉韧带及内侧半月板;造模完成后第8周,模型组、D-AIa2GIP治疗组腹
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目的:观察葡萄糖依赖性肠促胰岛素类似物D-AIa2GIP拮抗骨性关节炎模型鼠细胞外基质代谢异常。方法:将18只雄性SD大鼠(购买于XXXX大学的实验动物中心)共分为3组(假手术组、模型组、模型治疗组),每组6只:模型组、D-AIa2GIP治疗组切断左右后膝关节前交叉韧带、切除内侧半月板;假手术组只切开左右后膝关节囊,不切断前交叉韧带及内侧半月板;造模完成后第8周,模型组、D-AIa2GIP治疗组腹腔注射25nmol/kg葡萄糖依赖性肠促胰岛素类似物D-AIa2GIP,2次/周,注射8周;对于假手术组则用相同剂量的生理盐水进行腹腔注射。造模16周后,(1)处死各组SD大鼠,并取出各组膝关节进行ICRS大体评分,并对各组大鼠的膝关节进行番红“O”-固绿染色,观察各组大鼠膝关节软骨组织的结构特点;(2)线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。(3)抽取各组SD大鼠膝关节液,ELISA技术检测取各组大鼠膝关节MMP-13及IL-1β因子;(4)Western blot测细胞色素c、II型胶原蛋白的含量变化。结果:(1)(1)大体评分:与假手术组(15.50±0.83)进行对比,模型治疗组的评分稍低(13.67±0.81,P>0.05),模型组的评分明显降低(8.00±0.89,P<0.05),模型治疗组与模型组进行对比(P<0.05)。(2)番红O-固绿染色显示:假手术组的蛋白多糖多表达的比较均匀,软骨的厚度比较正常;与假手术组相比,模型组的蛋白多糖的表达欠均匀,而且其组的软骨厚度也变薄了,其纤维化的程度/范围都重而且大;而使用过DAla2GIP治疗后的模型治疗组蛋白多糖表达基本、尚可均匀,软骨的厚度较模型组增加。(2)线粒体膜电位变化:与假手术组(12.80%±2.91%)进行比较,模型治疗组的膜电位变化范围稍高(15.68%±1.19%,P>0.05),模型组的膜电位变化范围明显增高(21.06%±0.87%,P<0.05),模型组与模型治疗组进行对比(P<0.05)。(3)ELISA技术检测:(1)IL-1β:与假手术组(369.36±33.42pg/ml)进行比较,模型治疗组IL-1β含量稍微增高(387.24±24.05pg/ml,P>0.05),模型组IL-1β含量明显增高(896.57±76.19pg/ml,P<0.05);模型治疗组组与模型组进行对比(P<0.05)。(2)MMP-13:与假手术组(500.83±65.38pg/ml)进行比较,模型治疗组MMP-13的含量稍微增高(562.13±79.23pg/ml,P>0.05),模型组MMP-13的含量明显增高(803.25±84.47pg/ml,P<0.05),模型治疗组与模型组进行对比(P<0.05)。(4)Westernblot检测组织标本:(1)Cyt-c:与假手术组(100%±3%)进行比较,模型治疗组Cyt-c的含量稍增高(140%±33%,P>0.05),模型组Cyt-c的含量明显增高(188%±16%,P<0.05);模型治疗组与模型组进行对比(P<0.05)。(2)col-II:与假手术组为(98%±2%),模型治疗组的col-II含量稍降低(92%±16%,P>0.05),模型组的col-II明显降低(39%±7%,P<0.05);模型治疗组与模型组进行对比(P<0.05)。结论:(1)D-Ala2GIP可以抑制损伤软骨细胞线粒体膜电位异常去极化促发Cyt C的释放;(2)D-Ala2GIP可逆转骨性关节炎中细胞外基质的紊乱,如降低IL-1β、MMP—13的含量,增加col-II的含量,进一步保护软骨组织。
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