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目的:研究红毛七的化学成分,建立红毛七多糖的超声波提取最佳工艺。评价红毛七乙醇提取物、萃取部位、多糖和单体化合物的体外抗氧化活性,为红毛七的进一步研究开发和应用提供科学依据。
方法:将红毛七药材干燥、粉碎,95%乙醇回流提取,提取液经减压浓缩得浸膏,浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得各萃取部位。经体外抗氧化活性筛选,确定较好的活性部位。分离活性较好的乙酸乙酯和正丁醇萃取部分,利用各种分离方法分离其中的化合物,利用现代波谱学技术(1H-NMR、13C-NMR、DEPT、HMBC、HMQC等)和化学方法对所得化合物进行结构鉴定。利用超声提取-紫外分光光度法测定技术,以多糖提取率为指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验对红毛七多糖的超声提取工艺进行优选。考察了料液比、超声波提取温度、提取时间及提取功率对红毛七多糖提取率的影响,建立了超声波提取红毛七多糖的最佳工艺。以VC作阳性对照,将红毛七乙醇提取物、萃取部位、多糖和各化合物对DPPH、O2-·、·OH、亚硝酸盐的清除及抗油脂氧化等体外抗氧化活性进行评价。
结果:从红毛七乙酸乙酯和正丁醇部位分离得11个化合物,经各种化学和波谱学方法鉴定8个化合物,其结构分别为:红毛七新碱(CRE-3)、刺囊酸-α-L-吡喃阿拉伯糖苷 [echinocystic acid-3-O-α-L-arabinopyranoside](CRB-2)、常春藤皂苷元-3-O-β-D-葡萄吡喃糖-(1→2)-a-L-阿拉伯吡喃糖苷(Hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl -(1→2)-α-L-arabinopyranoside)(CRB-3)、常春藤皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(Hederagenin-3-O-α-L-arabinopyranoside)(CRB-4)、葳严仙皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯吡
喃糖苷(Caulophyllogenin-3-O-α-L-arabinopyranoside)(CRB-5)、胆甾醇(Cholesterol)(CRB-1)、β-豆甾醇(β-sitgmasterol)(CRE-1)、羽扇豆醇(Lupeol)(CRE-2)。其中CRE-3为新化合物,CRB-1、CRB-2、CRE-1和CRE-2均为首次从该植物:中分离得到。
首次建立了超声波提取红毛七多糖的最佳工艺条件。实验结果显示料液比和超声波功率对红毛七多糖提取率的影响起主要作用,确定超声波提取红毛七多糖的最佳工艺条件为: 料液比1:20,超声波功率为70 W,提取温度为65℃,超声波提取时间为70min。
体外抗氧化实验结果显示,红毛七乙醇提取物、萃取部位具有较好的对DPPH自由基、O2-·、·OH、亚硝酸盐的清除和抗油脂氧化作用,其中乙酸乙酯部位和正丁醇部位作用明显。红毛七多糖具有较强的DPPH自由基、O2-·、·OH、亚硝酸盐的清除作用。对化合物体外活性筛选发现CRB-2、CRB-3、CRB-4、CRB-5和CRE-3均具有较强的对DPPH自由基、O2-·、·OH、亚硝酸盐清除和抗油脂氧化能力,其中CRB-4和CRB-5的抗氧化活性与VC相当或更好。
结论:从红毛七中分离得到11个化合物,已鉴定的8个化合物,1个为新化合物,4个首次从该植物中分离得到。建立的红毛七多糖的超声波提取最佳工艺简便、经济、准确、高效,在此工艺条件下多糖的提取率达13.67%。红毛七乙醇提取物、萃取部位具有一定体外抗氧化活性,其中乙酸乙酯部位、正丁醇部位作用明显。红毛七多糖具有较强的体外抗氧化活性。单体化合物体外活性筛选发现CRB-3、CRB-4和CRB-5具有较强的体外抗氧化活性。