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为了研究优质鸡脂肪沉积的分子调控机制,本试验采用优质鸡HS1系为试验材料,AA肉鸡为对照,在个体和细胞水平上研究脂肪代谢相关基因的表达规律,以期找出调控脂质代谢的候选基因,为优质鸡的后续选育提供科学依据。本试验选取了AA肉鸡和优质鸡HS 1系21d胚胎的肝脏组织进行数字基因表达谱测序分析(DGE),筛选出了品种间差异表达的基因,尤其是脂肪代谢相关基因,从转录组水平分析两种鸡脂肪代谢存在差异的遗传机理;运用Real-Time PCR定量分析AA肉鸡和优质鸡HS1系在28 d、49 d和70 d时ACC、FAS、PGC-1α.PPARγ. SREBP-1c和PLIN1基因的表达,从个体水平上研究DGE所得结果;取12d的AA肉鸡腹部脂肪,培养原代鸡前脂肪细胞,分析ACC、FAS、PGC-1α、PPARγ、SREBP-1c和PLIN1基因在脂肪细胞分化过程中的表达规律,从细胞水平上探究候选基因在脂肪细胞分化过程中的作用机制。采用DGE技术对AA肉鸡和优质鸡HS1系肝脏转录组测序,每个文库分别获得了约690-957万个的表达标签,约685-950万个的Clean data:通过比对,鉴定出14977个基因,其中有1270个基因在P<0.05水平上存在显著差异,有493个基因在P<0.01水平上存在差异极显著。通过GO和Pathway分析,这些差异基因富集到细胞凋亡、细胞循环、鞘脂类代谢、醚脂类代谢、PPARs信号通路、脂肪细胞因子信号通路、mTOR信号通路和胰岛素信号通路等生物学过程。其中,有34个与脂代谢相关的基因在AA肉鸡和优质鸡HS1系间差异显著,包括PPARγ和PLIN1等基因。脂肪代谢相关因子PPARγ和PLIN1在优质肉鸡HS1系肝脏中的表达量分别是AA肉鸡的3.79和5.42倍。此外,与PPARγ密切相关的几个基因SREBP-1c.FAS,ACC和PGC-1α在AA肉鸡和优质鸡HS1系间也存在差异,其倍比分别为0.29、0.76、0.17和0.61。定量分析AA肉鸡和优质鸡HS1系肝脏、腹脂和皮脂中几个候选基因,发现品种、日龄和组织因素对ACC、FAS、PGC-1α、PPARγ、SREBP-1c和PLIN1基因的表达均存在较大影响,具体表现为除脂肪合成相关基因FAS外,其它五个基因在28 d、49 d和70 d时在优质鸡HS1系的肝脏和腹脂中的表达量均高于AA肉鸡;随着日龄的增加,ACC、FAS、PPARγ、SREBP-1c和PLINl在优质鸡HS1系腹脂中的表达均呈先降低后升高趋势,PGC-1α在两种鸡肝脏中均呈先增后减趋势,在腹脂中均呈不断上升趋势;PGC-1α在肝脏中的表达量高于腹脂和皮脂,ACC、FAS、SREBP-1c、 PPARγ和PLIN1均表现为在腹脂中表达量高于肝脏和皮脂。此外,本试验进行了鸡前脂肪细胞的原代培养和诱导分化。采用CCK-8法检测细胞生长曲线,发现诱导组和对照组鸡前体脂肪细胞都在36 h时开始大量增殖;60h时增殖速度达到最大;72 h时细胞增殖速度下降。采用油红O提取比色法测定细胞内脂肪含量,发现诱导组和对照组前脂肪细胞内脂肪含量均在24 h较少,24 h后开始大幅度增加,60 h时达到最高水平;72h时明显下降,且表现为诱导后24 h开始诱导组脂肪含量高于对照组。同时,对脂肪细胞分化过程中对ACC、FAS、PGC-1α、 PPARγ.SREBP-1c和PLIN1进行定量分析,发现这些基因在的表达均表现为在48 h表达量最高,24 h和70 h表达量相对较低;且诱导分化48 h和70 h的表达量均为诱导组高于对照组。本试验首次利用数字基因表达谱技术全面筛选了AA肉鸡和优质鸡HS1系21d胚胎肝脏中差异表达基因,鉴定出了14977个在AA肉鸡和优质鸡HS1系上表达的基因,其中1270个存在显著差异。AA肉鸡和优质鸡HS1系生长过程中,品种、日龄和组织因素对ACC、FAS、PGC-1α、PPARγ.sREBP-1c和PLINl基因的表达均存在较大影响。脂肪细胞分化过程中ACC、(?)REBP-1c和PLIN1的表达在诱导分化后48h和70 h诱导组显著高于对照组,FAS和PPARγ的表达在72 h诱导组显著高于对照组,推测这些基因可能对脂肪细胞的分化具有促进作用。