维生素E琥珀酸酯对人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡杀伤作用的研究

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目的目前国内外关于维生素E琥珀酸酯( Vitamin E Succinate,VES)对鼻咽癌细胞系的作用尚未见报道,本试验以低分化鳞癌人鼻咽癌细胞系CNE-2为研究对象,了解VES对鼻咽癌细胞系CNE-2的生长抑制作用;观察VES作用于鼻咽癌细胞系CNE-2后细胞的形态变化;了解VES对鼻咽癌细胞系CNE-2的凋亡诱导作用;了解VES作用于鼻咽癌细胞系CNE-2后对细胞周期的调控作用,为VES应用于鼻咽癌的临床治疗提供前期的理论依据。方法体外培养CNE-2细胞并传代,采用四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazodium bromide,MTT)比色法观察不同浓度的VES(5、10、20、40μg/ml)在不同的作用时间(24、48、72h)对CNE-2细胞的生长抑制作用。采用倒置显微镜和透射电子显微镜观察VES作用与CNE-2细胞后的形态改变。用流式细胞仪检测VES对鼻咽癌细胞作用后的细胞凋亡率和VES对鼻咽癌细胞的细胞周期调控作用。采用SPSS13.0统计软件处理数据,细胞生长抑制试验采用重复测量的方差分析,细胞凋亡率和细胞周期的数据统计学分析采用卡方检验,取α=0.05为显著性检验水准。结果VES作用于人鼻咽癌细胞CNE-2后,对细胞有明显的抑制作用,这种抑制作用与药物浓度和作用时间有关。5μg/ml处理组24h和对照组相比差异无统计学意义(P=0.5822),其余各组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。生长曲线显示:同一作用时间,与对照组相比,VES浓度越高,抑制率越高;药物浓度相同,随着作用时间的延长,与对照组相比,其抑制率越高。光镜和透射电镜下可观察到VES作用于鼻咽癌细胞系CNE-2细胞后发生形态学变化,可找到典型的凋亡细胞。流式细胞仪检测不同浓度VES作用于鼻咽癌细胞系CNE-2后发现:药物浓度越高,其凋亡率越高,经卡方检验,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测不同浓度VES作用于鼻咽癌细胞系CNE-2后可见G0 /G1期细胞增多,经卡方检验结果有统计学意义,提示VES对鼻咽癌细胞系CNE-2细胞周期有调控作用(P<0.01)。结论本实验研究证实维生素E琥珀酸酯对鼻咽癌细胞系CNE-2的生长有明显的抑制作用,其抑制效应与药物的剂量和时间有关。维生素E琥珀酸酯对鼻咽癌细胞系CNE-2作用后,能引起细胞形态的变化。维生素E琥珀酸酯能够诱导鼻咽癌细胞系CNE-2的凋亡。维生素E琥珀酸酯对鼻咽癌细胞系CNE-2具有细胞周期调控作用,细胞凋亡峰出现在G0/G1期。
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