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目前不论是生命领域还是药学界的发展都离不开分析技术这一助跑器。在众多分析手段中,色谱技术一直受到人们的青睐。而固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。本文研究合成了两种用于生物大分子分离纯化的新型无孔固相萃取剂。本小组合成了3μm无孔脲醛树脂-二氧化锆复合微球,并用扫描电子显微镜对其进行表征。利用基体表面上的酰胺键与丙烯酸甲酯和乙二胺进行三次马氏加成反应和胺化反应,形成末端为胺基的聚胺基酰胺星型树状间隔臂。再用咪唑法将牛血清白蛋白对其表面进行修饰,制成BSA-UF-ZrO2固相萃取剂。考察了磷酸缓冲溶液含有不同浓度盐溶液时,溶菌酶和卵清蛋白两种蛋白在BSA-UF-ZrO2固相萃取剂上的吸附量和洗脱率的变化。结果表明,BSA-UF-ZrO2固相萃取剂对溶菌酶的最佳吸附时间是4h,最佳介质(缓冲溶液)的pH值是6.0,吸附量最高达53.14 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 5 mol/L的NaCl,洗脱率达73.26%,0.125 mol/L的KSCN洗脱率达76.68%;对卵清蛋白的最佳吸附时间是6 h,体系溶液的pH值是6.0,吸附量最高达35.38 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 5 mol/L的NaCl,洗脱率达78.05%,0.25 mol/L的KSCN洗脱率达83.07%。本小组还制备了L-phenylatanine-UF-ZrO2固相萃取剂。以溶菌酶和卵清蛋白作为测试蛋白,分别考察了时间、pH值、洗脱试剂及其浓度对吸附量和洗脱率的变化。结果表明,L-phenylatanine-UF-ZrO2固相萃取剂对溶菌酶的最佳吸附时间是6 h,最佳介质(缓冲溶液)的pH值是6.0,吸附量最大达52.94 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 25 mol/L的NaCl,洗脱率达71.62%,0.25 mol/L的KSCN洗脱率达76.39%;对卵清蛋白的最佳吸附时间是6 h,体系溶液的pH值是6.0,吸附量最大达36.17 mg/g,最佳洗脱试剂是0.25 mol/L的NaCl,洗脱率达76.63%,0.125 mol/L的KSCN洗脱率达90.52%。