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树突状细胞（dendritic cell，DC）是免疫系统主要的抗原提呈细胞（antigen presenting cell，APC），其在固有免疫反应和适应性免疫反应中均有重要作用。但就肺腺癌而言，其抗原刺激DC成熟的最佳方式以及负载肺腺癌抗原后的DC与自然杀伤细胞（natural killer，NK）间相互作用的机理尚不完全清楚。目的用凋亡（1.33μmol／L顺铂所致）以及（热休克、反复冻融和5.32μmol／L顺铂所致）坏死的肺腺癌A549细胞作为肿瘤相关抗原（tumor associated antigen，TAA），分别刺激人外周血单核细胞来源的DC（monocyte-derived DC，mo-DC）。通过比较凋亡和坏死的A549细胞对mo-DC表型、超微结构和白介素（interleukin，IL）-12分泌量的影响，来评估二者对诱导mo-DC成熟能力的影响，同时观察凋亡的肺腺癌A549细胞所诱导成熟的mo-DC（A-DC）对NK细胞杀伤能力的影响。材料与方法体外诱导DC，并用不同实验条件下所得的TAA负载于DC；流式细胞术测定DC表面标志，电镜观察DC形态和超微结构，ELISA法测定IL-12分泌量；流式细胞术和Hoechst染色判定A549细胞凋亡；4h-51Cr释放法测定A-DC对CD56+NK细胞杀伤K562细胞能力的影响。结果（1）顺铂浓度为1.33μmol／L时，A549细胞凋亡率可达19.7％，细胞大多被阻滞在G1期；顺铂浓度为5.44gmol／L时，A549细胞几乎全部死亡。（2）扫描电镜下可见DC伸展出大量大小不一、扁平的胞质突起，其末端圆钝且细胞膜光滑无皱折。成熟的DC（mature DC，mDC）于不成熟的DC（immature DC，iDC），但表面突起较iDC减少。（3）透射电镜下可见DC的胞体周围有不规则突起和褶皱；胞核染色深，偏向一侧，形状不规则，多为分叶状，内异染色质沿核边高度凝聚；胞质线粒体较为丰富，较多吞饮大泡及小泡。mDC胞体周围突起较iDC减少。（4）人DC特异性表面标志CD1a为68.7％。不同实验条件（L-DC、H-DC、A-DC和N-DC）刺激下DC的表面标志HLA-DR分别为6.98％、34.12％、39.49％、19.13％，CD80分别为11.2％、40.55％、54.33％、49.76％。A-DC的表面标志HLA-DR显著高于L-DC和N-DC的表达（P＜0.01），但与H-DC表达相近（P＞0.05）；A-DC与N-DC表面均高表达CD80，虽然前者略高于后者，但二者间无显著性差异（P＞0.05）。（5）DC和L-DC仅能分泌少量IL-12，其细胞上清液浓度低于20 pg·ml-1；H-DC、N-DC和A-DC分泌IL-12的能力增强，其细胞上清液浓度分别为（201.5±30.3）、（41.2±5.9）和（289.7±45.2）pg·ml-1。N-DC的IL-12分泌量较DC和L-DC有增加，H-DC和A-DC的IL-12分泌量均明显增加，与其余各组间有显著性差异（P＜0.01），其中尤以A-DC的IL-12分泌量最高，与H-DC间差异显著（P＜0.05）。（6）与NK细胞对K562的裂解能力比较，DC和A-DC均能使NK细胞对K562的杀伤能力增强，而且差异显著（P＜0.01）：在DC作用下，当效靶比（effector：target，E：T）为5、10和20时，NK细胞对K562细胞的裂解率分别为（3.7±0.96）％、（18.33±2.29）％和（46.8±3.39）％；在A-DC作用下，E：T为5、10和20时，NK细胞对K562细胞的杀伤能力进一步增加，其裂解率分别为（13.33±0.76）％、（33.67±1.19）％和（55.87±2.50）％。（7）当A-DC的上清液加入NK细胞时，NK细胞对K562细胞的杀伤能力显著增加，如E：T为20时，K562细胞裂解率为（45.73±0.06）％，而未加A-DC时K562细胞裂解率（10.7±0.529）％（P＜0.01）。（8）当E：T为20时，NK细胞对K562细胞的裂解率是（47.1±0.96）％；加入干扰素（interferon，IFN）-γ后，NK细胞对K562细胞的裂解率是（46.9±4.85）％，与NK细胞对照组无显著差异（P＞0.05）；加入IL-12后，NK细胞对K562细胞的裂解率是（61.1±1.57）％，与另外二组差异显著（P＜0.01）。（9）当E：T为20时，NK细胞对K562细胞的裂解率是（19.2±0.82）％；加入A-DCsup后，NK细胞对K562细胞的裂解率是（48.9±3.84）％，与NK细胞对照组差异显著（P＜0.01）。加入IFN-γab后，A-DCsup作用下的NK细胞对K562细胞的裂解率是（45.3±1.31）％，与A-DCsup组无显著差异（P＞0.05）；加入IL-12ab后，是（48.1±0.49）％，与A-DCsup组无显著差异（P＞0.05）。结论1、顺铂所致凋亡的A549细胞能刺激DC成熟。2、iDC通过细胞间接触，增强NK细胞的细胞毒作用。3、A-DC通过细胞间接触和分泌细胞因子的方式，增强NK细胞的细胞毒作用。4、A-DC可通过IL-12和IFN-γ以外的细胞因子活化NK细胞的细胞毒作用。