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背景胃癌是世界上常见的恶性肿瘤中居第四位,也在全球因恶性肿瘤死亡的第三位。Anoikis,即失巢凋亡,是由于细胞与细胞外基质和其他细胞失去接触而诱导的一种特殊的程序化细胞死亡形式。失巢凋亡通过传统的细胞凋亡途径诱导细胞死亡。但是近年来的研究显示肿瘤细胞可以抵抗这种程序性的死亡过程,肿瘤细胞一旦开始发生转移,即获得了抗脱落凋亡的能力。报道显示组织因子TF在多种癌症种都高表达,且TF的表达越高,患者的预后越差,但是胃癌中TF的表达情况与anoikis的关系并没有看到相关研究。目的1.研究TF在正常胃上皮细胞和不同分化程度胃癌细胞株中的表达情况;2.研究贴壁和悬浮状态下胃癌细胞细胞中TF的表达情况是否存在差异以及这种差异对细胞的凋亡的影响;3.研究贴壁和悬浮状态下胃癌细胞的凋亡情况;4.研究TF敲减与否对胃癌细胞侵袭及转移的影响,进而证实TF与anoikis之间的关系;5.若TF对anoikis有影响,探讨可能的机制以及通路。方法1.WB检测正常胃上皮细胞GES和不同分化程度的胃癌细胞MGC-803SGC-7901,BGC-823,MKN45,AGS中TF的表达量,筛选高表达TF的细胞株;2.敲减最高表达TF的胃癌细胞株,WB验证结果;3通过悬浮24h和48h敲减和未敲减的选定的胃癌细胞,WB验证24h和48h各自TF的表达变化;4.敲减和未敲减TF的胃癌细胞对照,做Transewll,划痕实验,CCK8,流式等检测细胞侵袭,凋亡,迁移等特性;4.通过WB验证TF是否通过糖酵解途径及线粒体氧化磷酸化途径中的乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)抑制anoikis;5.WB验证经典凋亡途径的几种抗体表达情况;6.对照两种状态下胃癌细胞在小鼠体内成瘤速率。结果1.WB结果显示:对比正常胃上皮细胞GES,TF在低分化细胞BGC-823表达最高;2.敲减TF的胃癌细胞的Transewll,划痕实验,CCK8,流式的结果与未敲减TF的胃癌细胞相比提示敲减胃癌细胞侵袭,转移,增殖都降低,凋亡未有明显变化;3.模拟胃癌转移,悬浮结果提示敲减和未敲减悬浮细胞的TF表达量随着悬浮均增加;4.悬浮敲减TF和未敲减TF的胃癌细胞,流式结果提示敲减的凋亡率高于未敲减,提示TF可能和anoikis相关;5.小鼠成瘤实验提示敲减TF的瘤子明显小于未敲减TF的,证明TF对胃癌细胞的成瘤速度有很大帮助。结论综上所述,我们的研究结果表明TF在胃癌细胞的侵袭,迁移,增殖中发挥作用,并且通过抑制anoikis现象促进其转移,这个可能与能量代谢途径有关,PDK1/3显示有差异,凋亡结果提示可能与其凋亡不通过经典的凋亡途径。同时敲减TF的成瘤明显。所以,TF可能成为胃细胞癌诊断的可能标志物或者靶点,这也为胃癌的诊断及治疗提供了一个新思路。