穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经Nrf2/HO-1通路的影响

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目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变模型小鼠的抗氧化应激通路的影响,为痛性糖尿病周围神经病变的临床治疗提供了深层次的理论基础。方法:采用随机数字表法,在83只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只作为正常组(CON),其余作为造模组,将造模组以高脂饮食喂养8周,连续2天腹腔注射链脲佐菌素(STZ)70mg/kg。将血糖高于16.7mmol/l的小鼠纳入后续研究,以普通饲料喂养6周,6周后测机械痛阈下降50%的小鼠造模成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组(DM),薯蓣皂苷低剂量组(DIO50)(52.26 mg/kg),薯蓣皂苷高剂量组(DIO100)(104.52 mg/kg)和α-硫辛酸组(ALA)(100mg/kg),灌胃治疗持续8周。实验期间观察小鼠行为状态,动态监测血糖和体重。通过热尾浸泡试验和爪触觉反应测试来检测薯蓣皂苷对小鼠痛阈的影响。通过免疫荧光和Western印迹分析检测坐骨神经中Nrf2,HO-1和NQO1的表达水平。使用SPSS软件进行统计分析,P<0.05具有统计学意义。结果:1.造模组小鼠精神状态差,气味重,行动缓慢,毛发干枯无光泽,并且出现多饮、多食、多尿伴有消瘦。8周后,各治疗组的小鼠仍存在上述表现,但较模型组相比症状减轻。2.造模组与正常组小鼠相比,血糖水平明显上升(P<0.01);治疗8周后,各治疗组小鼠的血糖水平与模型组相比均出现降低(P<0.01),并且高剂量组低于α-硫辛酸组(P<0.01)。3.造模组与正常组小鼠相比,体重明显下降(P<0.01);治疗8周后,治疗组小鼠的体重水平与模型组相比有所上升(P<0.01),且薯蓣皂苷治疗组与α-硫辛酸组相比有统计学意义(P<0.05)。4.造模组与正常组小鼠相比,热痛阈明显降低(P<0.01);4周、8周时治疗组与模型组相比痛阈明显提高(P<0.01),高剂量组与α-硫辛酸组相比无统计学差异;造模组与正常组小鼠相比,机械痛阈明显降低(P<0.01);4周、8周时治疗组与模型组相比痛阈明显提高(P<0.01),薯蓣皂苷治疗组与α-硫辛酸组相比无统计学差异。5.治疗8周后,模型组与正常组小鼠相比,坐骨神经中Nrf2、HO-1、NQO1的表达水平均明显降低(P<0.01);薯蓣皂苷低剂量组小鼠的HO-1表达水平高于模型组(P<0.05);薯蓣皂苷高剂量组与α-硫辛酸组小鼠的Nrf2、HO-1、NQO1表达水平均明显高于模型组(P<0.05),且高剂量组与α-硫辛酸组相比无统计学差异。结论:实验结果表明穿山龙薯蓣皂苷能够改善痛性糖尿病周围神经病变(PDPN)小鼠的精神状态及行为变化,改善痛阈,并调节Nrf2/HO-1信号通路,通过改善氧化应激来发挥神经的保护作用。
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