论文部分内容阅读
目的：研究散发性乳腺癌中UHRF1调控BRCA1转录的分子机制。方法：通过报告基因、RT-PCR、Western blot, CHIP等方法研究在散发性乳腺癌中UHRF1对BRCA1启动子活性、转录水平以及蛋白表达的作用,探索其作用机制。结果：在散发性乳腺癌中,JHRF1高表达,而BRCA1低表达或者表达缺失。UHRF1可通过与HDAC1, DNMT1及G9a形成转录复合物结合到BRCA1启动子上并抑制其转录,同时通过HDAC1, DNMT1, G9a这些转录因子使得BRCA1启动子上发生了乙酰化组蛋白H3,乙酰化组蛋白H4的去乙酰化,三甲基化组蛋白H3K4,二甲基化组蛋白H3K9的甲基化。荧光报告基因发现UHRF1复合物是通过结合到BRCA1启动子的CCAAT盒上来抑制BRCA1启动子的活性的。利用RNA干扰技术下调UHRF1表达后,BRCA1表达显著上调。雌二醇可上调BRCA2启动子活性并抑制抑制UHRF1复合物结合到BRCA1启动子上。在过表达UHRF1后则可逆转以上由雌二醇所引起的效应。而UHRF1可抑制BRCA1保护细胞抵抗H2O2的能力。结论：在散发性乳腺癌中,过表达的UHRF1与BRCA1启动子上的DNA甲基化,组蛋白的去乙酰化,甲基化以及转录抑制复合物的形成密切相关。这是首次报道在散发性乳腺癌中UHRF1通过介导BRCA1启动子上DNA甲基化以及组蛋白修饰来调控BRCA1的表达。JHRF1可能是散发性乳腺癌一个新的,潜在的癌基因。