microRNA-7在肝癌生长及转移过程中的调控作用研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qiuzhiye51
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
microRNA(miRNA)是一类非编码的内源小RNA,它在各种生物学过程中都发挥着重要作用。已有的研究表明在包括癌症在内的多种疾病中均存在miRNA表达失控的现象。近年来在对肝癌产生及发展的分子机制研究中发现,多种miRNA均与肝癌的发生以及后续进程相关。nicroRNA-7(miR-7)是新近发现的—种具有抑癌作用的miRNA,在脑胶质瘤和乳腺癌中能够有效地抑制肿瘤生长,但是miR-7在肝癌进程中扮演的角色尚不明了。本论文以miR-7为研究对象,基于已有的研究成果通过解析其参与调控的信号通路,探索miR-7参与肝癌进程调控的分子机制,为其未来的临床应用提供理论依据。在本研究中,通过对miR-7的靶基因进行生物信息学分析和双荧光素酶报告系统检测,首次筛选并鉴定了一个全新的靶基因PIK3CD,该基因是PI3K/Akt信号通路的重要成分之一并且与细胞增殖以及迁移能力的调控密切相关。体外实验的结果表明,在PIK3CD mRNA的3’UTR中存在4个miR-7的靶位点,miR-7通过与之结合在转录后水平上调控该基因的表达。在肝癌细胞QGY-7703中瞬时或稳定过表达miR-7均能特异性地抑制PIK3CD的表达而不影响其他PI3K亚基成分的表达。通过观察miR-7稳转亚克隆肝癌细胞系的细胞周期变化,发现稳定过表达miR-7能有效地在G0-G1期阻滞肝癌细胞周期进程,并将肝癌细胞的细胞周期时程延长2~4小时。体外细胞增殖实验的结果表明过表达miR-7能有效抑制肝癌细胞的增殖。同时,对于肝癌细胞侵润和迁移能力的分析显示,在体外过表达miR-7能显著降低肝癌细胞的迁移能力。在进一步考察了过表达miR-7对于整个PI3K/Akt信号通路表达的影响后,发现过表达miR-7能显著降低Akt、mTOR以及p70S6K的表达,同时上调4EBP1的表达。此外,通过对上述PI3K/Akt信号通路中的主要成分进行生物信息学分析和双荧光素酶报告系统检测,我们发现其中两个主要成分mTOR和p70S6K同样受miR-7特异性调控,暗示了miR-7在对该信号通路的调控中发挥重要作用。在在体实验中,通过建立皮下植瘤小鼠模型,发现稳定表达miR-7能有效减缓肿瘤生长(肿瘤体积减小约3.5倍)。在肝癌转移小鼠模型中,稳定表达miR-7能够有效抑制肝癌肺转移(肺部表面的肿瘤结节数量减少了32倍)。在皮下生长肿瘤组织以及肝癌肺转移结节中,通过对miR-7和PI3K/Akt信号通路中主要成分的表达分析发现两者之间依然存在良好的负相关性。在对肝癌临床样本的相关指标检测中同样显示miR-7表达与PI3K/Akt信号通路的表达呈负相关并且与肝癌进程密切相关。上述研究结果提示miR-7在肝癌中发挥着抑癌基因的作用,通过靶向调控PI3K/Akt/mTOR信号通路miR-7在体外、体内均能有效地抑制肝癌的生长和转移。本研究对nicroRNA参与调控肝癌发生发展的分子机制提出了一种全新的假说,同时也提示了其在肝癌诊断、预后及靶向治疗中潜在的应用前景。
其他文献
目的探讨听性脑干反应(ABR)、耳蜗电图(ECochG)对2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者听功能检测的价值。方法 76例DM患者,按年龄段分为DM青年组(〈45岁,22例)和DM中老年组(≥45岁,54
现今大学里的经济专业中,有两门课极受学生欢迎,一门主要是讲与企业家有关的东西,一门是微观经济学.学生们感兴趣的原因在于,今天的人赚钱、发财的欲望特别强烈,在他们看来,
输电铁塔主要采用角钢或钢管结构焊接而成。其中,对于输电线路钢管杆一般的工艺流程为先完成板材的下料和折弯,再焊接成钢管,接下来完成钢管、法兰盘和筋板的焊接。针对输电
<正>本人是一名基层法制栏目的编导和记者,所从事的《法治广场》栏目是我台一档老牌的法制类专题节目。每周播出一期,时长为15分钟,栏目题材的来源主要有四个方面:公安、检察
军队疗养院是特殊的医疗单位,主要担负着对我军中高级干部和特勤人员的疗养康复、增进健康工作。军队疗养院里每天都有很多疗养员要护理,同时也有很多种标本要进行处理,这些
为实现耳机大规模定制设计且满足用户使用舒适性需求的目标,提出人耳甲腔网格曲面自动重构的方法。将310个样本的耳甲腔网格曲面均重构为由795个型值点组成的NURBS曲面;进一
<正>我国电视法制节目是20世纪80年代初随着改革开放开始的法制建设产生的,之后如雨后春笋般不断涌现,现如今已经到了遍地开花的程度,作为一个主流电视节目类型雄霸荧屏。但
第一部分Smad3功能的丧失导致主动脉瘤的形成TGF-β信号通路的紊乱导致动脉的形成,近期报道TGF-β重要信号通路分子Smad3突变可以导致早期骨关节炎-动脉瘤综合症。我们的研究
随着我国建筑企业工程项目管理体制改革的深入,建筑业的生产方式和组织结构形式发生了深刻的变化,工程项目管理水平的高低成为制约企业生存与发展的第一要素。以工程项目管理为