【摘 要】
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目的:观察对比慢性脑缺血小鼠脑和视网膜小胶质细胞（MG）在不同时间点的时空变化。方法:3月龄C57BL/6J小鼠行改良型双侧颈总动脉结扎（2VO）制作慢性脑缺血模型,甲苯胺蓝染液心尖灌注观察验证模型。建模后7d、14d、28d,分别取脑组织和视网膜进行组织学和免疫组化染色,观察脑组织海马、皮质以及视网膜的病理改变,以及MG标志物IBA1、M1型指标i NOS、M2型指标TREM2的表达变化。结果:
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目的:观察对比慢性脑缺血小鼠脑和视网膜小胶质细胞（MG）在不同时间点的时空变化。方法:3月龄C57BL/6J小鼠行改良型双侧颈总动脉结扎（2VO）制作慢性脑缺血模型,甲苯胺蓝染液心尖灌注观察验证模型。建模后7d、14d、28d,分别取脑组织和视网膜进行组织学和免疫组化染色,观察脑组织海马、皮质以及视网膜的病理改变,以及MG标志物IBA1、M1型指标i NOS、M2型指标TREM2的表达变化。结果:甲苯胺蓝灌注结果显示,2VO术后即刻小鼠脑组织染色明显变浅,随着缺血时间延长,脑组织染色有一定程度加深,但始终低于正常脑组织。HE染色结果显示,2VO术后7d,海马CA1区细胞体积增大、胞质淡染;CA3区细胞异形;DG区出现空泡、细胞体积增大、胞质淡染及细胞异形;皮质区细胞排列疏松、体积增大,胞质部分淡染或沉着;视网膜GCL细胞体积增大、胞质淡染,INL、ONL细胞间隙增大。术后14d,海马CA1区开始出现核碎裂;皮质区部分细胞聚集成团;INL出现细胞排列紊乱、核异形。术后28d,海马CA3区出现核碎裂;INL细胞排列疏松。GCL和INL术后细胞数量减少,且随时间延长而逐渐加重。免疫组化结果显示,较假手术组,2VO术后7d,海马CA1、CA3、皮质区IBA1、i NOS表达增加,TREM2表达减少,DG区i NOS表达增加,TREM2表达减少;视网膜GCL、IPL中IBA1、i NOS、TREM2表达均增加,INL中i NOS、TREM2表达增加。术后14d,海马CA1、CA3、DG、皮质区IBA1、i NOS表达增加,TREM2表达减少;视网膜GCL中IBA1、i NOS、TREM2表达均增加;IPL、INL中IBA1、i NOS表达增加。术后28d,海马CA1区IBA1增加,TREM2表达减少;CA3、DG、皮质区IBA1、i NOS表达增加,TREM2表达减少;视网膜GCL、IPL、INL中IBA1、i NOS、TREM2表达均增加。其中CA1区的IBA1,DG区、皮质区、GCL中的i NOS阳性表达皆随着缺血时间延长而递增。结论:1.改良型2VO能引起小鼠脑组织的有效缺血。2.脑缺血后小鼠海马、皮质及视网膜出现一定程度的细胞损伤。3.慢性脑缺血后,海马、皮质和视网膜的小胶质细胞阳性表达均增加。4.总体上,海马和皮质MG激活时M1型i NOS增加,M2型TREM2减少;而视网膜MG激活时M1型i NOS和M2型TREM2均增加。以上结果提示,脑组织和视网膜内的MG对脑缺血的反应具有一定协同性,视网膜内MG的变化有可能预示脑内的炎症变化,但与此同时,脑组织和视网膜的MG激活时M1型和M2型表达存在一定差异性,对此尚需深入研究。
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