【摘 要】
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目的探讨成体大鼠脊髓源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的作用下体外分化的形态学表现,为成体脊髓源性NSCs移植治疗脊髓损伤提
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目的探讨成体大鼠脊髓源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的作用下体外分化的形态学表现,为成体脊髓源性NSCs移植治疗脊髓损伤提供理论基础。方法利用无血清悬浮培养,体外分离培养SD大鼠脊髓源性NSCs,随后以含血清培养基贴壁诱导分化培养7d,行免疫细胞化学染色,以抗巢蛋白(Nestin)鉴定NSCs,以胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)以及抗微管相关蛋白2(microtubule associated protein,MAP2)检测NSCs向神经元和星形胶质细胞方向的分化情况。选取第3代NSCs,向培养基中添加EPO,使EPO的终浓度为10IU/ml,并设不添加EPO的对照组,免疫荧光共聚焦显微镜下分别观察并计数各组神经元/细胞总数得出百分率。结果SD大鼠脊髓组织体外悬浮培养可获得大量神经球,所获得的神经球均表达Nestin蛋白,以含血清培养基贴壁诱导分化培养,可检测出MAP2和GFAP阳性细胞;EPO组诱导分化后,表达MAP2阳性细胞较对照组显著提高(P<0.05)。结论SD大鼠脊髓体外培养可获得NSCs;EPO可促进成体脊髓源性NSCs向神经元方向分化。
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