人参总皂苷（Total Saponins of Panax Ginseng，TSPG）作为常用中药人参中的主要活性成分之一，具有抗肿瘤的药理作用。近年来，我们课题组已经证明：TSPG是一种适应源性药物，既能促进正常造血干／祖细胞向红系细胞增殖分化，又能抑制K562细胞增殖，诱导其凋亡或向红系细胞分化。探讨其机制发现它以不同的红细胞生成素受体（erythropoietin receptor，EpoR）机制影响正常血细胞（Epo依赖）和异常血细胞（Epo非依赖）的增殖分化或存活，反映出Epo对不同类型的造血细胞具有不同的作用。再者，越来越多的研究显示，Epo／EpoR在一些非造血组织和细胞中亦有表达，造血刺激物可能通过其诱导细胞增殖和血管发生等机制加速肿瘤发展。本研究以Epo依赖性细胞TF1/Epo和Epo非依赖性细胞K562为研究对象，观察TSPG的主要单体成分之一Rg1对细胞EpoR及其活性的影响，比较探讨不同类型白血病细胞增殖分化或凋亡调控的EpoR机制，为临床应用人参皂苷Rg1治疗不同类型血液病（尤其有关红细胞发生异常的血液病）乃至某些非造血细胞肿瘤的策略提供实验依据和有益线索。第一部分人参皂苷Rg1对不同类型白血病细胞增殖和诱导分化的影响目的：研究Rg1对不同类型白血病细胞生长的影响及诱导分化作用方法：体外培养TF1/Epo和K562细胞，选取处于对数生长期的细胞用于实验。对照组：不施加药物干预,常规培养；人参皂苷Rg1诱导组，常规培养基础上加不同浓度的Rg（110μmol/L、20μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L），分别作用24h、48h、72h后进行CCK-8法比色实验，检测Rg1对TF1/Epo和K562细胞增殖的影响。采用流式细胞技术检测经最适作用浓度和最适作用时间的Rg1作用后TF1/Epo和K562细胞的周期分布和细胞表面分化抗原CD14、CD15、CD235a表型的改变。结果：人参皂苷Rg1在体外能明显抑制TF1/Epo及K562细胞的增殖，100μmol/L为最佳作用浓度，48h为最佳作用时间；与对照组相比，人参皂苷Rg1诱导组细胞明显阻滞于G1期；经100μmol/L Rg1作用48h后TF1/Epo及K562细胞表面分化抗原中除CD14外，可诱导为红细胞系、粒细胞系的表面标志物CD15、CD235a表达均升高。结论：Rg1能抑制两种不同类型白血病细胞细胞株生长，并诱导其向红细胞系、粒细胞系分化。第二部分人参皂苷Rg1对不同类型白血病细胞EpoR表达与活化的影响目的：研究Rg1对不同类型白血病细胞EpoR表达与活化的作用方法：体外培养TF-1/Epo和K562细胞，选取处于对数生长期的细胞用于实验。分别收集经100μmol/L的Rg1诱导24h、48h后和对照组细胞，对各组的细胞提取总RNA，对其进行质量鉴定后，运用Realtime-PCR技术检测EPOR基因的表达。行流式细胞术，激光共聚焦显微镜观察Rg1诱导前后表达EpoR细胞的阳性率。用Western blot观测全蛋白、膜蛋白中EpoR蛋白的表达及其活性的影响。结果：Realtime-PCR检测结果显示Rg1诱导组EPOR mRNA较对照组显著减少，流式细胞术显示经Rg1诱导后呈EpoR阳性表达的细胞较诱导前减少，激光共聚焦显微镜观察发现经药物诱导后细胞膜荧光强度较诱导前减弱。Western Blot检测经100μmol/L Rg1诱导48h后的TF-1/Epo和K562细胞总蛋白、膜蛋白中EpoR蛋白表达均减弱。另外在Rg1诱导的早期，TF-1/Epo细胞无论经Epo刺激与否实验组EpoR磷酸化水平均较空白对照组有所下降，但在K562细胞中该作用不明显。结论：Rg1使两种类型细胞EpoR表达降低，两种类型细胞胞膜EpoR蛋白表达随Rg1作用时间的增加而显著下降。在EpoR蛋白质水平降低之前，Rg1已使得TF-1/Epo细胞EpoR介导信号通路转导的能力减弱，K562细胞此作用不明显。