烤瓷合金对293肾细胞毒性实验研究

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目的:针对四种常用烤瓷合金进行细胞毒性检测,探讨烤瓷合金对293肾细胞毒性的对比实验研究,选择对人体安全性能高的烤瓷合金,为临床应用提供相应的理论参考数据。方法:用含20%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养人正常肾细胞293细胞株,制备镍铬合金、钛合金、钴铬合金、银钯合金的浸提液(根据IS010993)。用1d、3d、5d四种烤瓷合金浸提液分别干预293肾细胞2d、4d、6d。对细胞生长状态进行观察,记录形态变化;并分时段分别进行MTT实验检测细胞相对增值率和RT-PCR检测在细胞生长周期中Bax基因、P53基因的表达情况。结果:用1d、3d、5d的四种烤瓷合金的浸提液分别干预293肾细胞2d、4d、6d后,结果为:(1)细胞贴壁生长,如铺路石状。镍铬合金组、钛合金组与阴性对照组比较细胞数量减少,并出现少量凋亡的细胞,部分细胞细胞异型性生长,细胞亮度增加。钴铬合金组、银钯合金组与阴性对照组比较出现少量凋亡细胞,细胞生长状态无明显差异。(2)当相同浸润时间的合金浸提液培养293肾细胞2d、4d、6d,其中合金组在2d时的OD值与阴性对照组比较P>0.05,无统计学意义;而在4d、6d时与阴性对照组比较P<0.05,有统计学意义。(3)当用1d、3d、5d的合金浸提液分别培养细胞相同天数,其中合金组在1d时的OD值与阴性对照组比较P>0.05,无统计学意义,而在3d、5d时与阴性对照组比较P<0.05,有统计学意义;(4)四种合金组与阴性对照组比较,P<0.05,有统计学意义;除银钯合金和钴铬合金组比较,P>0.05,无统计学意义以外,其他合金组组间比较,P<0.05,有统计学意义;综上所诉,依据毒性分级可判断毒性大小依次为:镍铬合金组>钛合金组>钴铬合金组≥银钯合金组。结论:四种临床常用烤瓷合金对细胞增殖存在一定影响。但是其对细胞毒性的影响在临床应用的允许范围内,符合牙科材料的生物安全性评价。烤瓷合金对细胞增殖的大小存在时间相关性,即时间越长,其对细胞的毒性越大。不同种类烤瓷合金对细胞增殖影响存在差异,其毒性从大到小依次为镍铬合金>含钛合金>银钯合金>钻铬合金。
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