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本论文通过3个试验系统研究了日粮中不同水平和来源的镁对肉仔鸡组织抗氧化能力的影响及其机制。
试验1:研究日粮中不同水平和来源的镁对肉仔鸡肝脏等组织抗氧化酶活性和脂质过氧化水平的影响,并从不同的角度揭示镁调节肉仔鸡肝脏过氧化氢酶活性的机理。在3×4因子随机设计中,360只1日龄的AA公鸡随机分配到10个处理组,每个处理组6个重复,每个重复6只鸡。三种镁源是氧化镁(Mgo)、天门冬氨酸镁(MgAsp)、天门冬氨酸螯合镁(MgdiAsp),镁的添加水平分别是0.9、1.8、2.7g/kg,三种镁源共用不加镁的基础日粮组作为空白对照。结果表明:(1)21日龄肉仔鸡血清中镁含量随日粮中镁添加量的增加线性提高(P<0.01),21日龄肉仔鸡肝脏镁的含量随日粮中MgO、MgASp添加量的提高呈二次曲线性提高(P<0.01),有机镁比无机镁更有效提高血清和肝脏中镁含量(P<0.01)。(2)21日龄肉仔鸡肝脏过氧化氢酶(CAT)的活性随MgAsp或MgdiAsp添加量的增加线性提高(P<0.01),随MgO添加量的增加呈二次曲线性提高(P<0.05),MgdiAsp处理组表现最大的CAT活性,MgAsp次之,MgO最低(P<0.01)。基础日粮中添加镁显著提高总SOD的活性(P<0.01),但1.8g/kg和2.7g/kg两个添加水平之间没有差异。有机镁比无机镁更有利于降低肝脏中MDA的含量(P<0.01),肝脏丙二醛(MDA)的浓度随日粮镁添加量的增加线性降低(P<0.05)。(3)有机镁比无机镁更有利于提高21日龄肉仔鸡脾脏CAT的活性(P<0.01),CAT的活性随MgO添加水平的提高呈线性提高(P<0.01),随MgdiAsp添加水平的提高呈二次曲线性提高(P<0.01)。在基础日粮中添加镁提高了21日龄肉仔鸡脾脏中总SOD的活性(P<0.05),MgAsp比Mgo和MgdiAsp的效果更显著(P<0.01)。MgAsp比MgO和MgdiAsp更能提高脾脏GSH-px的活性(P<0.01)。(4)42日龄肉仔鸡脾脏CAT的活性随MgO添加水平的提高呈线性提高(P<0.05),随MgdiASP添加水平的提高呈二次曲线性提高(P<0.05),MgdiAsp比MgAsp和MgO更有利于提高42日龄肉仔鸡脾脏中总SOD和GSH-px的活性。(5)当日粮中镁添加量增加时,过氧化氢酶mRNA丰度线性提高,三种镁源均是如此(P<0.01)。MgdiAsp处理组表现最大的过氧化氢酶mRNA表达量,MgAsp次之,MgO最低(P<0.01)。日粮中添加镁不影响肝脏中Mn和Fe的沉积,但降低肝脏Cu和Zn的含量。肝脏CAT的活性、mRNA水平、肝脏镁的含量三者之间表现显著的正相关(P<0.01),肝脏CAT的活性与Cu、zn的含量之间没有显著的相关性。
试验2:在体外酶促反应体系中,镁离子的浓度不影响肉仔鸡肝脏CAT的活性。
试验3:研究日粮镁对肉仔鸡肝细胞内离子镁的浓度、腿肌中活性氧产量、红细胞体外氧化应激敏感性及红细胞膜流动性的影响。 96只1日龄的AA肉仔鸡随机分配到低镁日粮组和对照组,每个处理6个重复,每个重复8只鸡。低镁日粮组和对照组的日粮的镁含量分别是1.2g/kg,2.4g/kg。结果表明:(1)低镁日粮组肉仔鸡肝细胞内离子镁的浓度(P<0.05)和CAT(P<0.01)的活性显著低于对照组,二者之间表现显著的正相关(P<0.01,R<2>=0.635)。(2)低镁日粮显著降低腿肌中的镁含量(P<0.05),提高肉仔鸡腿肌匀浆液中活性氧的产量(P<0.05);腿肌中铁、钙及不饱和脂肪酸(除C18:2外)的含量在两个组之间没有差异;低镁日粮组线粒体复合酶Ⅱ,Ⅲ的活性显著高于对照组(P<0.01)。腿肌匀浆液中活性氧的产量与线粒体复合酶的活性表现显著的负相关。以上结果说明低镁日粮提高线粒体复合酶的活性,提高肉仔鸡腿肌中活性氧浓度,从而影响腿肌中脂质过氧化程度。(3)在体外应激反应体系中,低镁组肉仔鸡红细胞的MDA生成量高于对照组(P<0.01)。低镁日粮显著提高红细胞膜的各向异性参数(P<0.05)。与对照组相比,低镁组肉仔鸡的红细胞GSH的含量降低了17%,MDA的含量升高了19%(P<0.05);红细胞膜的镁含量降低18%(P<0.05)。低镁日粮组的肉仔鸡红细胞膜胆固醇的含量(P<0.05)及胆固醇/磷脂比(P<0.01)均显著高于对照组。以上结果说明低镁日粮削弱了肉仔鸡红细胞的抗氧化系统从而提高红细胞对体外氧化应激的敏感性:红细胞膜胆固醇含量的提高是低镁日粮降低红细胞膜流动性的原因。总结以上试验结果认为,日粮中添加镁可以显著改善肉仔鸡的镁营养状态,提高肝脏、脾脏等组织的抗氧化酶活性,降低组织的脂质过氧化水平。有机镁比无机镁更有利于提高血清中的镁浓度和肝脏CAT的活性。肝脏镁含量的提高促进CAT基因的表达从而提高了过氧化氢酶的活性可能是日粮镁调节肉仔鸡肝脏CAT活性的机制,肉仔鸡肝细胞内离子镁的浓度和CAT活性显著低于对之间的正相关进一步证明这一观点。日粮镁影响机体的氧化应激状态不仅通过影响抗氧化酶的活性,而且可能通过影响组织中的活性氧产量。