【摘 要】
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第一部分不同预处理方法对感染组织微生物复苏量的影响目的:评价不同预处理方法对感染组织微生物复苏量的影响方法:采用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、大肠杆菌(Escherichia coli,EC)和白色念珠菌(Candida albicans,CA)的标准菌株在无菌猪肉组织上构建单表面、全表面和内部感染的模型,分别采用手工研磨(manual milling,MM)
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第一部分不同预处理方法对感染组织微生物复苏量的影响目的:评价不同预处理方法对感染组织微生物复苏量的影响方法:采用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、大肠杆菌(Escherichia coli,EC)和白色念珠菌(Candida albicans,CA)的标准菌株在无菌猪肉组织上构建单表面、全表面和内部感染的模型,分别采用手工研磨(manual milling,MM)、机械匀浆化(Mechanical Homogenization,MH)、超声裂解(ultrasonic lysis,UL)、二硫苏糖醇(Di-thiothreitol,DTT)、直接培养(direct culture,DC)方法预处理后进行培养。比较不同预处理方法的对不同微生物感染模型中病原菌的复苏能力。结果:单表面或全表面感染模型,无论SA、EC、CA感染,MH组微生物获取量均明显高于MM组(P<0.01)、UL组(P<0.01)和DC组(P0.05)。而内部感染模型,无论SA、EC、CA感染,MH组均明显高于MM组(P<0.01)、UL组(P<0.01)、DTT组(P<0.01)和DC组(P40mg,来自炎症反应最明显的3个部位的假体周围组织),随机分配至机械匀浆化(T-MH)组、手工研磨(T-MM)组、二硫苏糖醇(T-DTT)组、超声裂解(T-UL)组、直接培养(T-DC)组。采用相应方法处理获取接种标本,Bactec Plus/F需氧培养瓶和Bactec Lytic/10/F厌氧培养瓶培养14天。培养阳性标本使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定菌种及药敏分析仪Vitek2系统行药敏鉴定。观察和比较5种不同组织处理方法的微生物培养结果,分析其对PJI诊断的敏感性及特异性。结果:最终纳入PJI病例28例,AF病例18例。28个PJI病例中,T-MH培养检出23例,T-DTT培养检出22例,T-UL培养检出20例,T-MM培养检出15例,T-DC培养组检出13例,关节液(JF)培养检出15例,假体超声液(P-UL)检出18例。T-MH与T-DTT培养的敏感度高于其他检测方法,且与JF培养相比差异均有统计学意义。联合两种培养可进一步提高敏感度,而特异度无明显下降。结论:通过组织机械匀浆化方法培养的敏感度较高,结合无需特殊设备、且流程简便不易污染的组织二硫苏糖醇法,可以有效提高PJI的病原诊断效率,推荐在临床工作中采用两种组织处理方法联合使用。
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