目的：绝经后骨质疏松是妇女在绝经后发生的一种全身性骨量减少，骨组织微细结构受损而导致骨脆性增加，骨折危险性升高的疾病。以单位体积的骨量降低，骨基质的有机成份生成不足，继发钙盐沉着减少为特征。多属高转换型，其发病机理非常复杂，可能是激素、遗传、营养、年龄、废用、免疫等多因素交互作用的结果。 目前研究表明，一类被称为晚期糖化终末产物(advanced glycosylation end products，AGEs)的物质在骨质疏松发病中可能具有重要作用，这类物质是体内糖的醛基或酮基与蛋白质等的自由氨基经过非酶促反应形成的具有特征性荧光的化合物，具有交联特性，能够使被修饰的蛋白等物质分子之间发生交联，从而改变这些物质的生理功能。另一方面可与其细胞膜表面受体结合，促进该细胞合成和释放细胞因子和生长因子。生理浓度的AGEs是机体组织重建和内环境稳定所必需，过多积累则引起许多病理改变，骨基质是非酶糖化的好发部位，胶原蛋白上AGEs的形成与堆积，可以导致胶原交联与抗蛋白酶作用增强，引起超微结构与生理功能改变，削弱成骨细胞对于骨基质的粘附作用，从而抑制骨形成的启动，另外非酶糖化使胶原纤维变硬，并继发钙盐沉积异常，而骨钙素的非酶糖化，进一步影响了基质矿化。除直接修饰作用外，体外研究发 中文摘要现，AGES可以刺激人单核细胞、人骨源性细胞、小鼠成骨细胞分泌IL刁、IL6、TNF等促进骨吸收的因子。研究表明AGES在老年性骨质疏松和糖尿病性骨质疏松发病中具有重要作用。年龄增长和糖代谢紊乱是引起AGE增加的主要原因，而绝经可引起糖代谢紊乱，可能引起AGE的生成和沉积增加。 骨钙素是成熟的成骨细胞分泌的一种基质蛋白，与骨基质矿化有关，是反映骨形成和骨转换率的一个灵敏而特异的指标，本实验主要通过检测AGEs对骨钙素以及其他相关指标的影响来探讨AGES在绝经后骨质疏松发病中的作用。 方洁：l、动物模型及分组：本研究采用切除双侧卵巢诱导骨质疏松大鼠模型，将雌性SD大鼠39只随机分为三组，分别为假手术组（切除少量脂肪L卵巢切除组（双侧卵巢切除）以及氨基狐治疗组（双侧卵巢切除＋0刁％氨基肌喂养），90大后，禁食收集24h尿液，股动脉放血处死收集血液，取材。2、荧光分光光度法测定各组骨胶原中AGES含量3、双能X线骨密度仪测胜骨和股骨骨密度4、RTPCR法测定骨组织骨钙素mRNA表达。5、放射兔疫分析法测定血清骨钙素含量6、血、尿生化指标测定7、晚期糖化终末产物对离体大鼠成骨细胞骨钙素合成、分泌以及碱性磷酸酶活性的影响：本实验通过体外葡萄糖与牛血清白蛋白孵育的方法制得AGE－蛋白（AGE－BSA卜 并以不同浓度（50pg／ml、100yg／ml、200pg／ml、400pg／ 二 中文摘要 ml、800卜g／ml、1000卜g／ml）加入成骨细胞培养体系， 作用不同时间（24h、48h、72h、96h），测定成骨细胞 AKP 活性及培养基中OC含量。 结果：l、骨胶原中AGE的相对含量：卵巢切除组u 6．86 土 3．13RU／Ing）与假手术组（53．83士 5．46RMg）相匕， AGES的相对含量明显升高，p＜0．00，氨基肌治疗组6．23 士7．46RU／mg）与卵巢切除组（56．86士3．13RU／Ing）相卜， AGES的相对含量明显降低，p＜0刀5。 2、大鼠股骨、胜骨的骨密度：卵巢切除组与假手术组相比 较，骨密度明显降低O＜0刀5）；氨基肌治疗组与卵巢切除组 相比较，大鼠股骨骨密度有升高趋势，胜骨骨密度显著升 高（p＜0刀5）。 3、骨组织骨钙素InRNA含量：卵巢切除组与假手术组相 比较，骨钙素表达明显增加（功．05）；氨基肌治疗组与卵巢 切除组相比较，骨钙素表达明显降低巾刃刀5人 4．血清骨钙素含量：卵巢切除组门7石1上4．38屹几）与假 手术组门刀9士 2．26屹 ／L）相比，具有升高趋势；氨基腑 治疗组（16．62士2．93p叭）与卵巢切除组（17．61士4．38pg 几）相比，具有降低趋势。 5、血、尿生化指标：卵巢切除组与假手术组相比，血钙有 降低趋势，血磷有升高趋势，血清碱性磷酸酶活性显著升 高O＜O．002）；氨基肌治疗组与卵巢切除组相比，血钙明显 升高巾叩刀05人血磷和血清碱性磷酸酶活性有降低趋势。 卵巢切除组与假手术组相比，24小时尿钙、尿钙与肌配比 值、24小时尿磷、尿磷与肌研比值均有升高趋势，24小时 尿羟脯氨酸，尿羟脯氨酸与肌酚比值具有降低趋势；氨基 3 中文摘要肌治疗组与卵巢切除组相比，24小时尿钙、尿钙与肌酚比值降低，24小时尿羟脯氨酸升高，与手术组比较有显著差