两种锌源对奶山羊锌转运蛋白基因SLC39A1-3表达的影响

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenghao131
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为了研究日粮中分别添加两种不同的锌源后对奶山羊锌转运蛋白表达的影响,本试验随机挑选9只2.53岁健康且体况相似的关中奶山羊,并随机分为硫酸锌(ZnSO4)组、氨基酸锌(Zn-AA)组和对照组。分别饲喂Zn浓度为60mg/kg的ZnSO4日粮和Zn-AA日粮,以及无添加锌日粮,并同时给予Zn浓度为60mg/kg的ZnSO4水和Zn-AA水,以及去离子水。饲料和饮用水均任动物自由采食。一周后屠宰取组织样品,液氮中保存。此后将人、小鼠、牛和绵羊ZIP锌转运蛋白Ⅱ亚家族的ZIP13等3个锌转运蛋白的基因SLC39A13的序列对山羊的ESTs和UniGene进行搜索,拼接后设计引物通过反转录PCR(RT-PCR)对奶山羊的这3个基因进行克隆,并对其在奶山羊23种组织中的分布进行检测,再通过荧光定量PCR对饲喂两种不同锌源后这3种基因在奶山羊的真胃、十二指肠近段、中段、远段、空肠、回肠、肝脏和肾脏等8种锌主要消化吸收部位中的表达情况进行初探。主要结果如下:1、奶山羊锌转运蛋白基因SLC39A1的克隆与组织分布克隆的奶山羊SLC39A1基因包含一个完整的开放阅读框架(open reading frame, ORF),长度为972bp,编码由324个氨基酸残基组成的ZIP1蛋白,其中酸性氨基酸为42个,碱性氨基酸为24个,分子量为34.18 kDa,等电点为5.567。该基因在真胃、十二指肠近段、十二指肠中段、十二指肠远端、空肠、回肠、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、胰脏、肌肉、大脑、瘤胃、网胃、瓣胃、直肠、结肠、盲肠、皮肤和乳腺21种组织中有分布。2、奶山羊锌转运蛋白基因SLC39A2的克隆与组织分布克隆的奶山羊SLC39A2基因包含一个完整的ORF,长度为927bp,编码由309个氨基酸残基组成的ZIP2蛋白,其中酸性氨基酸为39个,碱性氨基酸为23个,分子量为32.79 kDa,等电点为5.07。该基因在真胃、十二指肠近段、十二指肠远端、空肠、回肠、肝脏、脾脏、肺脏、胰脏、肌肉、大脑、瘤胃、网胃、瓣胃、直肠、结肠、盲肠、皮肤、睾丸和乳腺20种组织中有分布。3、奶山羊锌转运蛋白基因SLC39A3的克隆与组织分布克隆的奶山羊SLC39A3基因包含一个完整的ORF,长度为942bp,编码由314个氨基酸残基组成的ZIP3蛋白,其中酸性氨基酸为39个,碱性氨基酸为31个,分子量为33.97 kDa,等电点为5.854。该基因在真胃、十二指肠近段、十二指肠中段、十二指肠远端、空肠、回肠、肝脏、脾脏、肺脏、胰脏、肌肉、大脑、瘤胃、网胃、瓣胃、直肠、结肠、盲肠、皮肤、睾丸和乳腺21种组织中有分布。4、SLC39A1 mRNA在不同锌处理组中的表达变化在十二指肠远段中ZnSO4组奶山羊的SLC39A1 mRNA的表达量显著升高,Zn-AA组也有所升高,但差异不显著;在十二指肠中段中两个试验组的奶山羊SLC39A1 mRNA的表达量均有所下降,差异不显著;而在其余组织中两个加锌试验组奶山羊SLC39A1 mRNA表达量均有所升高,差异也不显著。5、SLC39A2 mRNA在不同锌处理组中的表达变化在真胃中Zn-AA组奶山羊的SLC39A2 mRNA的表达量显著降低,而ZnSO4组较对照组略有升高,但差异不显著;在十二指肠中段中ZnSO4组的奶山羊SLC39A2 mRNA的表达量显著升高,Zn-AA组有所升高,差异不显著;在回肠中,ZnSO4组SLC39A2 mRNA表达量有所升高,差异不显著,Zn-AA组有所降低,差异也不显著,但是两个加锌试验组间差异显著;在肝脏中,ZnSO4组显著降低,Zn-AA组显著升高,两个加锌试验组间差异也显著;在十二指肠近段中,两个加锌试验组均有所降低,但是差异均不显著;而在其余组织中试验组间SLC39A2 mRNA表达量基本没有变化。6、SLC39A3mRNA在不同锌处理组中的表达变化在十二指肠近段中两个加锌试验组SLC39A3 mRNA表达量均显著降低;在十二指肠中段中Zn-AA组不仅与对照组相比表达量显著降低,与ZnSO4组相比也显著降低;在十二指肠远段中ZnSO4组表达量显著升高,Zn-AA组也有所升高,但是差异不显著;在空肠中两个加锌试验组表达均有所下降,差异不显著;在真胃、回肠和肝脏中,两个加锌试验组表达均有所升高,但是差异不显著;肾脏中三组间表达基本没有变化。
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