【摘 要】
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本研究以猪丹毒C43004(1a型)和C43-12(2型)两株不同血清型菌株为抗原提取菌株,选用EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原,首次建立了Dot-PPA-ELISA检测猪丹毒血清抗体方法,并确定了应用
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本研究以猪丹毒C43004(1a型)和C43-12(2型)两株不同血清型菌株为抗原提取菌株,选用EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原,首次建立了Dot-PPA-ELISA检测猪丹毒血清抗体方法,并确定了应用Dot-PPA-ELISA的最佳工作条件。通过用C43004(1a型)、C43179(1b型)和C43-12(2型)三株不同血清型的猪丹毒混合强毒同时对具有不同抗体效价的免疫猪和对照猪进行皮肤内接种攻毒,确定了猪能抵抗混合强毒攻击的抗体保护阳性标准为1:32。本试验方法用国产硝酸纤维素膜为固相载体制备的诊断膜片特异性强,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、大肠杆菌、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应;该方法敏感性高,能够最低检出猪血清中含2.61×10-9g的猪IgG抗体;膜片保存期长,在室温可保存4个月,4℃可保存7个月其检测活性不变。通过对免疫猪免疫后6周的抗体检测,证实Dot-PPA-ELISA能用于疫苗免疫猪后的抗体效价变化监测。本试验方法操作简便、快速准确、结果客观、易于判定,结果可存档、重复性好,所用试剂材料均可做到标准化,适合基层应用和猪群的猪丹毒抗体监测以及猪丹毒的流行病学调查。
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