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细胞与细胞外基质(extracellular matrix ECM)的相互作用能够调控细胞生长、生存、分化、增殖、迁移等细胞进程，如果细胞与胞外基质的相互作用失衡，细胞程序性死亡途径将被启动；而肿瘤细胞的分化、增殖及铺展同细胞与ECM黏附减少具有密切联系。整合素参与细胞的黏附过程并介导其信号传导，偶联整合素与其下游组分的胞内效应物对细胞黏附的信号传导起到关键作用，整合素连接激酶(Integrin-linked kinase ILK)就是其中之一。ILK参加细胞内多种基础功能的调控，ILK的微小变化如表达和活性的改变，和人类肿瘤的发生、发展都具有密切相关性。因此，ILK可以成为肿瘤治疗理想的靶位点。 目的：构建并合成ILK的全硫代修饰反义寡核苷酸(ASODN)，以阳离子脂质体导入胃癌SGC-7901细胞后，阻断胃癌细胞ILK蛋白的表达，并检测相关指标，评价ILK反义寡核苷酸对胃癌细胞的抑制及诱导凋亡作用。从而阐述ILK作为肿瘤治疗靶位点的价值，并为ILK反义核酸治疗肿瘤提供理论和试验依据。 方法：(1)应用阳离子脂质体将ILK的ASODN导入胃军医进修学院硕士学位论文中女摘要癌细胞系SGC一7901，以聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转染后胃癌细胞ILK的mRNA在转录水平上的变化;应用W七sternBlot方法检测转染后胃癌细胞ILK蛋白表达水平的变化。(2)应用MTS法检测ILK的ASODN导入胃癌细胞系SGC一7901后，对胃癌细胞体外增殖的抑制作用;应用流式细胞术检测ILK的ASODN导入胃癌细胞系SGC一7901后诱导胃癌细胞产生凋亡的作用。 结果:(1)胃疹SGC一 7901细胞转染ILK的ASODN 48小时后，PCR电泳产物可见984饰及584饰两条带。经凝胶图像分析ILK和p一actin荧光强度对比结果如下:ASODN浓度梯度组与单纯脂质体处理组和空白对照组比较，ILK的mRNA水平无明显变化，5组之间表达差异不明显。而正义寡核普酸(s ODN)组的m丑NA表达水平明显下降，同其他组之间具有明显差异。(2)胃癌SGC一7901细胞转染ILK反义寡核普酸48小时后，与空白对照组及单纯脂质体组相比，可以观察到反义寡核普酸抑制ILK蛋白表达呈剂量依赖关系，而空白对照组及单纯脂质体组则无此效应，但ILK的SODN组亦具有抑制ILK蛋白表达的效果。(3)ILK反义寡核普酸对胃癌细胞SGC一7901具有明显抑制作用，其抑制作用呈浓度依赖性;其中以ASODN4林mol/L组作用最大，24小时即有明显作用;ASODNZ卿ol/L和1卿ol/L组分别于48小时和72小时后出现最大抑制作用。(4)胃癌SGC一7901细胞转染ILK反义寡核普酸48小时后，流式细胞术检测细胞凋亡，应用凋亡细胞率进行分析:ASODN组1娜mol/L，2脚mol/L，4卿ol/L时的凋亡率分别为6.42%，18.75%，35一61%，SODN处理组为28.83%，空白脂质体组和空白对照组分别为3.85%，3.72%。军医进修学院丽+今抬格幸中文摘要表明随ASODN剂量加大，凋亡细胞则明显增多，这种变化趋势与细胞增殖抑制实验相符合。 结论:本试验选择ILK作为靶基因，设计一条ILK反义寡核普酸，并以阳离子脂质体导入细胞内，阻断ILK蛋白的表达，而达到抑制胃癌细胞的目的。从试验中可见针对ILK翻译起始区设计的反义寡核芬酸对胃癌细胞mRNA的转录虽无明显影响，但可以特异性地减少胃癌细胞SGC一7901表达ILK蛋白，对胃癌细胞SGC一7901的增殖具有明显的抑制作用，并诱导其凋亡。初步证明了ILK在促进细胞增殖，诱导细胞凋亡的过程中发挥着重要作用，为ILK反义寡核普酸治疗胃癌提供理论及试验依据;以上结果说明了ILK位点在胃癌治疗中具有较好的应用前景，可以为胃癌的治疗提供一条新的途径。