目的:利用人体外周血来源的树突状细胞(dendritic cells,DCs)强大的抗原提呈能力和激活T细胞尤其是初始型T细胞的能力,用腺样囊性癌细胞系总RNA转染DC制成一种治疗性疫苗,观察这种疫苗在裸鼠体内诱导肿瘤患者抗原特异性抗瘤免疫的能力。 方法:采集腺样囊性癌患者外周单核细胞,用贴壁方法分离单核细胞。贴壁的单核细胞加rhIL-4和rhGM-CSF常规条件下培养7天获得未成熟DC,观察DC形态,流式细胞仪确认DC的表面标志。从腺样囊性癌细胞系提取总RNA后转染DC。流式细胞仪测定转染前后DC的表面标志的变化。转染后的DC与自体T淋巴细胞混合,诱导T淋巴细胞成为抗原特异性CTL。流式细胞仪分析刺激前后T淋巴细胞成分变化。 建立裸鼠腺样囊性癌移植瘤模型,以DC激活的CTL预防性接种于裸鼠皮下,观察随后接种的腺样囊性癌细胞系移植瘤发生率。观察接种于裸鼠的腺样囊性癌细胞系移植瘤生长。 结果:提取腺样囊性癌细胞系总RNA后,电泳显示完整未降解。光学显微镜下单核细胞来源的DC有树枝状突起的典型形态。流式细胞仪分析显示不加TNF-a培养的DC特征性表面标志均未达到成熟,符合转染用DC的要求。转染腺样囊性癌细胞系总RNA后,DC特征性表面标志CD1a及递呈相关表面标志CD86表达上调,DC向成熟DC方向发展,间接说明了RNA在DC中得到了表达。DC刺激自体淋巴细胞5天后,CD8~+T细胞比例上升。预防组接种腺样囊性癌细胞后20天内,9只裸鼠中仅2只有移植瘤发生,而对照组27只均有移植瘤发生。接种后37天对照组、治疗组肿瘤大小分别为1293±170mm~2和669±100mm~2(P<0.05)。