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目的：本实验室前期分离得到一株深海来源曲霉（Aspergillussp.）,本实验的目的是提取分离纯化鉴定其次级代谢产物结构,然后研究分离得到的新化合物的肝癌细胞毒活性,并对其作用机理进行初步研究，从而筛选出具有明显抗肿瘤活性的化合物。方法：通过小规模发酵，乙酸乙酯萃取次级代谢产物并运用层析法对其进行分离纯化；利用质谱、核磁共振等对纯化的产物进行鉴定；用CCK-8法检测代谢产物对肝癌细胞的细胞毒活性，双向凝胶电泳法测定相关蛋白表达,对其细胞毒活性的作用机制进行初步探讨。结果：通过对曲霉（Aspergillussp.）的次级代谢产物的分离纯化，得到了四个单体化合物，并确定四种化合物分别为sterigmatocystine、anhydroorcinol、1’-methoxy-averantin、averufine。其中化合物anhydroorcinol对肝癌细胞的细胞毒活性强，对于正常肝细胞的毒活性却较低。通过对加药组和对照组的肝癌细胞株Bel7402和正常肝细胞株HL7702细胞的双向电泳结果进行比对，发现HL7702几乎找不到变化显著的蛋白点，而在Bel7402中找到15个有显著变化的蛋白点；又对HL7702和Bel7402进行蛋白质比较，以这15个有显著变化的蛋白点为目标，找到Bel7402与HL7702共同所有的蛋白点8个，其中用药组肝癌细胞株Bel7402的2个蛋白点上调，6个蛋白点下调。将这8个蛋白点进行MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析鉴定，共得到6个可信结果（p＜0.05），这六个蛋白点分别为KRT8、Keratin, typeⅠcytoskeletal19、Keratin, typeⅠcytoskeletal10、Alpha-enolase isoform1、 Glucose-6-phoaphate1-dehydrogenaseisoform b，还有一个未知蛋白(protein for IMAGE:3534054)。结论：1、从曲霉（Aspergillussp.）的次级代谢产物中分离纯化得到四个单体化合物，其中化合物anhydroorcinol对肝癌细胞的细胞毒活性强，对于正常肝细胞的毒活性却较低。2、化合物anhydroorcinol作用于肝癌细胞后，肝癌细胞显著变化的蛋白点15个，其中8个为正常细胞和肝癌细胞共同表达的蛋白点，且2个蛋白点上调，6个蛋白点下调。