低能量激光治疗对成骨细胞及骨愈合的影响及相关机制的实验研究

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激光是一种新型光源,具有方向性好、亮度高、单色性好、相干性好等优异的物理特性,可以在医学的诊断和治疗方面发挥巨大作用。低能量激光治疗(Low-Level-Laser- Therapy,LLLT)具有生物刺激效应,学者们发现它可以减轻疼痛、炎症、水肿,促进伤口、深层组织和神经的愈合。已有大量的体外和动物实验的研究证实LLLT可以促进成骨细胞增殖、分化和骨组织愈合,但应用于口腔种植领域的研究较少。LLLT的有效照射剂量和照射方式尚无统一标准,现仍有一些负面报道认为它对骨组织愈合没有作用,因此还不是一个被广泛接受的治疗手段。本研究尝试将LLLT应用于口腔种植领域,以验证LLLT是否能够有效的促进成骨细胞增殖、分化和骨形成,并探讨不同照射方式的LLLT是否有区别,为其应用于临床提供理论依据。本研究采用MTT、流式细胞术、细胞化学钙钴法检测人成骨样细胞MG-63的增殖、细胞周期、细胞凋亡和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达,观察了LLLT对MG-63生物学特性的影响。采用免疫组化、RT-PCR和Western Blot的方法检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、I型胶原(collagen I,coll I)的mRNA的表达量和蛋白表达量,观察了LLLT对MG-63细胞外基质蛋白的影响。此外,本研究观察了LLLT对大鼠股骨实验性骨缺损的刺激作用。结果表明,3.75 J·cm-2照射剂量的LLLT可以促进体外人成骨样细胞MG-63的增殖,改变细胞周期时相,抑制细胞凋亡,促进MG-63分泌成骨细胞早期标志物ALP,促进细胞外基质蛋白OPN、coll I的表达,30 J·cm-2照射剂量的LLLT可以促进大鼠股骨实验性骨缺损的骨愈合。此外,实验组中多次照射和单次照射比较并无不同。综上所述,本研究证实了LLLT可以促进成骨细胞增殖、分化,促进动物模型的骨形成,LLLT可能对种植术后的骨愈合有促进作用,具有临床意义,为LLLT应用于口腔种植领域打下坚实的实验基础。
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