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目的通过对比观察聚焦超声激励无水乙醇、聚桂醇对在体兔肝的消融效果,探讨FUS的超声效应对无水乙醇、聚桂醇消融兔肝的协同作用。方法(1)无水乙醇增强聚焦超声消融兔肝脏的有效性研究1实验动物分组及处理:健康新西兰大白兔27只,随机分为3组,无水乙醇组(EA)、聚焦超声联合无水乙醇组(FUS+EA)、单纯聚焦超声组(FUS),每组9只。具体实验过程如下:每只兔子取肝右叶较厚处为注射点,在超声引导下分别实施单纯E A消融、FUS+EA消融、单纯FUS辐照。联合组EA注射时同步应用FUS垂直辐照乙醇注射区域。注射剂量为0.2m L/次,缓慢注射,注射时间均控制在20s;FUS仪采用高档,功率为12.5W±20%,辐照时间20s。治疗后48小时团注0.1m L“脂氟显”行超声造影检查,观察并测量消融灶的长度(L)、宽度(W)、高度(H),使用椭圆体积公式计算体积(V=πLWH/6),随后处死动物,取出每组8只实验兔肝脏消融灶并通过量筒排液法测量消融体积,剩余1只用作病理学观察。2温度监测:将FUS组8只兔子肝中叶拖出至腹腔外,用盐水浸湿的无菌纱布块包裹固定。高频超声引导下将测温针沿肝缘斜行进针至肝叶内血管、胆管分布稀疏区域,针尖到肝表面约1cm,观察记录测温针尖所在区域60s内温度变化。穿刺过程中注意避开肝内较大的血管、胆道。实验过程中用测温针测量FUS辐照区域兔肝温度变化,获得温度变化数值,用graph prism 7绘制出温度曲线。3病理学观察每组各取1只实验兔,取肝右叶消融区域固定于4%多聚甲醛,石蜡包埋制作切片,进行HE染色,光学显微镜观察各组肝脏组织病理变化。(2)聚桂醇增强聚焦超声消融兔肝脏的有效性研究1实验动物分组及处理:健康新西兰大白兔27只,随机分为3组,聚桂醇组(L M)、聚焦超声联合聚桂醇组(FUS+LM)组,聚焦超声组(FUS),每组9只。具体实验过程如下:每只兔子取肝右叶较厚处为注射点,在超声引导下注射相应药物,分别实施LM消融、FUS+LM消融、FUS辐照。注射剂量为0.2 m L/次,缓慢注射,注射时间均控制在20s;FUS采用高档,功率为12.5 W±20%,辐照时间20s。各组在治疗前后分别对治疗区域进行常规超声检查,48小时后行超声造影检查,经耳缘静脉团注“脂氟显”,剂量为0.1m L/次,观察并测量消融灶的长度(L)、宽度(W)、高度(H),使用椭圆体积公式计算体积(V=πLWH/6),随后处死动物,取出每组8只实验兔肝脏消融灶并通过量筒排液法测量消融体积,剩余1只做病理学观察。2病理学观察每组各取1只实验兔,取肝右叶消融区域固定于4%多聚甲醛,石蜡包埋制作切片,进行HE染色,光学显微镜观察各组肝脏组织病理变化。结果1、无水乙醇增强聚焦超声消融兔肝脏有效性实验研究(1)量筒排液法测量消融体积单纯FUS组实验兔肝未产生肉眼可见的消融灶,消融灶体积为0m L,FUS+EA组消融体积为0.90(0.70,1.05)m L,EA组消融体积为0.20(0.20,0.26)m L。各组消融体积不全相同,差异有统计学意义(Z=27.04,P=0.00<0.05)。进一步组间两两比较结果显示,FUS+EA组消融体积均高于其余2组,差异有统计学意义(Z=5.20、-2.60,P均<0.05),EA组和FUS组消融效果比较,差异有统计学意义(Z=2.6,P=0.03<0.05),F US组消融效果最不明显,未见明确消融灶。(2)超声造影与大体标本评价超声造影显示:FUS组未见明显消融灶,EA、FUS+EA组消融灶呈充盈缺损区。超声造影结果与大体标本对照,消融效果相符。根据椭圆体积公式计算出消融灶体积,FUS组消融体积为0cm3、FUS+EA组消融体积为0.93(0.72,1.29)cm3、EA组消融体积为0.21(0.18,0.27)cm3。各组消融体积不全相同,差异有统计学意义(Z=26.80,P=0.00<0.05),进一步组间两两比较结果显示,FUS+EA组与FUS组、FUS+EA组与EA组比较,差异有统计学意义(Z=5.18、-2.56,P均<0.05),EA组和FUS组消融体积比较,差异有统计学意义(Z=2.56,P=0.03<0.05),FUS组消融效果最不明显,未见明确消融灶。(3)、测温结果测温针检测到兔肝基础温度为35.76±0.88℃,FUS照射区兔肝最高温度为44.04±1.26℃。(4)病理结果FUS组未产生任何微血管病理损伤,其余两组均出现广泛肝细胞凝固性坏死。2、聚桂醇增强聚焦超声消融兔肝脏的有效性研究(1)、量筒排液法测量消融体积单纯FUS组实验兔肝未产生肉眼可见的消融灶,消融灶体积为0m L,FUS+LM组消融体积为0.32(0.24,0.32)m L,LM组消融体积为0.19(0.14,0.24)m L。各组消融体积不全相同,差异有统计学意义(Z=27.04,P=0.00<0.05)。组间两两比较结果显示,FU S+LM组消融体积高于单纯FUS组,差异有统计学意义(Z=4.76,P=0.00<0.05),LM组消融体积高于单纯FUS组,差异有统计学意义(Z=2.87,P=0.01<0.05),FUS+LM组与LM组消融体积差异无统计学意义(Z=-1.69,P=0.27>0.05)。(2)、超声造影与大体标本评价超声造影显示:FUS组未见明显消融灶,FUS+LM、LM组消融灶呈充盈缺损区。超声造影结果与大体标本对照,消融效果相符。根据椭圆体积公式计算出消融灶体积,FUS组消融体积为0cm3、FUS+LM组消融体积为0.32(0.24,0.32)cm3、LM组消融体积为0.19(0.14,0.24)cm3。各组消融体积不全相同,差异有统计学意义(Z=22.23,P=0.00<0.05),FUS+LM组消融体积高于单纯FUS组,差异有统计学意义(Z=4.65,P=0.00<0.05),LM组消融体积高于单纯FUS组,差异有统计学意义(Z=3.00,P=0.01<0.05),FUS+LM组与LM组消融体积差异无统计学意义(Z=-1.46,P=0.44?0.05)。结论1、聚焦超声激励无水乙醇能够产生显著的协同效应,显著增大无水乙醇对兔肝的消融体积;2、聚焦超声激励聚桂醇未产生明显协同效应,不能显著增加聚桂醇对兔肝的消融体积;