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背景:先天性肾上腺皮质增生症（CAH）最常见的类型是CYP21A2基因突变所致的21-羟化酶缺乏症（21-OHD）。虽然其基因型与表型有比较好的相关性,但基因型在不同地区分布规律不一致;基因诊断有助于21-OHD患儿家庭遗传咨询与产前诊断。迄今为止,南方地区21-OHD的临床与基因分布特征还未见诸于报道。目的:在这项研究中,我们分析华南地区166例经典型CAH患者的临床特征,并探讨Sanger测序联合多重连接探针扩增技术（MLPA）对21-OHD的基因诊断作用;确定中国南方地区经典型21-OHD的基因突变频率,分析基因型-表型关系,为今后的遗传咨询、产前诊断提供实验基础。方法:收集2014年8月至2017年5月就诊于广州市妇女儿童医疗中心临床诊断为经典型21-OHD患儿166名（失盐型99例,单纯男性化型67例）。对这166名经典型21-OHD患儿及部分家系成员通过Sanger测序联合多重连接探针扩增技术（MLPA）进行基因诊断。根据基因突变类型分组研究不同组基因型与表型的关系,并比较不同基因突变频率在国内外不同地区的分布。在此基础上对6例先症者家庭进行了产前诊断分析。结果:1.166例经典型21-OHD患儿17羟孕酮值升高（>25ng/ml）,失盐型患者合并有其他肾上腺皮质激素异常及低钠血症（<135mmol/L）,89例合并有高钾血症（>5.5mmol/L）。2.在这166名经典型21-OHD患者332个等位基因中,检测到常见突变为:I2G（42.5%）,p.I173N（12.7%）,p.R357W（6.0%）,p.Q319X（5.1%）,р.G111Vfs*21（3.0%）,exon 6 I237N,V238E,and M240K cluster（E6）（0.9%）,c.923dupT（0.3%）,检测到大片段缺失/转换（23.8%）。罕见突变仅占8.4%,其中p.S126X,c.1209<sub>1210insT,p.C429X和c.840delG既往未见报道,为新突变。失盐型患者较常见突变为:I2G（42.9%）,大片段缺失/转换（28.3%）,p.R357W（8.1%）,单纯男性化型患者较常见突变为:I2G（41.8%）,p.I173N（29.1%）,大片段缺失/转换（17.2%）。1例患者存在Q319X相关的CYP21A2基因重复。3.166名经典型21-OHD患者共24种基因型。其中124名患者（74.7%）检测为复合杂合突变,另外42名患者（25.3%）为纯合突变。4.CYP21A2基因新罕见突变:无义突变p.S126X和p.C429X,及插入缺失突变c.12091210insT和c.840delG为失功能突变,为可能致病突变。5.Null组（92.3%）和B组（91.7%）患者基因型与表型相关性较好;A组（71.4%）出现了基因型与表型的分离。6.6个进行产前诊断的家系中,5个胎儿带有CYP21A2单杂合突变,为携带者;1个胎儿未携带CYP21A2基因突变,为正常个体可能性大。结论:1.在本研究中,点突变IVS2-13A/C>G（I2G）是42.9%的失盐型患儿的突变类型,41.8%的单纯男性化型患儿的突变类型,在这两型中IVS2-13A/C>G（I2G）都是最常见的突变类型。大片段缺失/转换是本人群第二常见突变类型。2.罕见突变占所有等位基因的8.4%,其中发现4个新突变,分别为:p.S126X,P.C429X,c.12091210insT和c.840delG。3.本研究同样发现了与Q319X相关的CYP21A2基因重复,但病例数并不多。4.“Null”组及“B”组基因型与表型相关性较好,可分别达92.3%和91.7%。5.Sanger测序结合MLPA方法可以有效地检测CYP21A2基因中的大多数不同类型的突变。