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肝癌是一种常见的恶性肿瘤之一,全世界每年有650,000多人死于肝癌。在过去十年中对肝脏原癌基因的分子机制有了进一步的了解,但随着医学理论发展起来的治疗方法通常在疗效上作用有限,而且常伴有毒副作用。而中草药兼具预防和治疗的作用,用中草药来源的天然药物化合物来治疗肝脏疾病受到高度关注。
延胡索,罂粟科植物延胡索Corydali.yanhusu.W.T.Wang的干燥块茎,是我国传统的栽培药用植物和著名的“浙八味”之一。主要含异喹啉类生物碱,像d-紫堇碱、d1-四氢巴马亭、普托品、1-四氢黄连碱等。现代中医药理论证明,延胡索具有活血、利气、止痛的功效,其镇痛、镇静催眠、抗冠心病等的作用都已得到广泛研究与临床应用。
本课题以延胡索为材料,对提取延胡索生物碱的提取工艺进行考察并确立了最佳提取条件。乙醇提取液通过乙醚、NaOH萃取,经大孔吸附树脂、硅胶色谱柱进一步纯化,得到三个组分,分别是水溶性生物碱、脂溶酚性生物碱和脂溶非酚性生物碱。通过半制备型高效液相色谱从脂溶非酚性组分中分离得到五个单体化合物,然后,利用波谱分析(核磁共振、质谱、红外光谱、紫外光谱)及其理化性质对五个化合物进行结构鉴定。采用MTT方法检测三个组分和五个单体化合物对肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的影响。
实验得到五个生物碱单体化合物:阿朴啡型的海罂粟碱;普托品类的普托品;原小檗碱类的8-氧黄连碱和四氢巴马亭;化合物X(有待进一步的鉴定检索)。通过细胞体外活性实验发现:脂溶非酚性组分的抗肿瘤活性最高,IC50约为3.μg/mL;五个单体化合物中海罂粟碱的抗肿瘤活性最高,IC50约为27μM。此研究为进一步研究活性成分的构效关系,为寻找结构更简单、疗效更高的新型药物打下基础,通过对作用机制的进一步研究可以获得化合物抗癌活性作用靶点的知识。