姜黄素是从传统中药姜黄中提取的一种天然植物多酚,已被证实具有逆转肿瘤多药耐药的功效,与阿霉素联合用药可以提高阿霉素对肿瘤细胞的敏感性,从而逆转肿瘤多药耐药性。根据叶酸受体在正常组织低水平表达而在某些肿瘤部位过度表达的特性,选择生物相容性好、天然无毒、价廉易得,并且具有一定抗肿瘤活性的生物大分子壳聚糖作为药物载体,阿霉素与姜黄素作为抗肿瘤药物,利用叶酸受体及其配体的结合具有选择性和特异性,将叶酸偶联至壳聚糖后再与抗肿瘤药物相结合,通过叶酸受体的介导作用,增加药物在病灶局部的浓度、提高疗效、降低毒副作用,达到逆转肿瘤多药耐药及靶向给药的目的。通过离子凝聚法制备壳聚糖空白纳米粒,通过红外、粒径分析和形态观察对其进行了表征,得到了粒径200nm左右,形态规整,在溶液中可稳定存在的纳米粒子;讨论了不同反应条件对生成纳米粒的影响,得出最优反应条件为:壳聚糖和TPP的浓度分别为2.5mg/mL和1mg/mL,反应温度25℃,搅拌速度500r/min,反应体系pH值为5.0～6.0。分别建立了阿霉素和姜黄素体外高效液相分析方法,用于载药纳米粒中包封率和载药量的计算。制备了壳聚糖载姜黄素纳米粒和壳聚糖载双药纳米粒,红外光谱(IR)结果表明,实验中成功制备了壳聚糖载姜黄素纳米粒和壳聚糖载双药纳米粒,纳米粒呈圆形,形态规整,粒径在260nm左右,壳聚糖载双药纳米粒中阿霉素的包封率和载药量分别为87.5%和40.5%,姜黄素的包封率和载药量分别为93.98%和43.3%。以壳聚糖为载体,叶酸为靶向受体,三聚磷酸钠为聚阴离子,姜黄素与阿霉素为药物模型,利用阴阳离子间的静电相互作用,合成了叶酸偶联壳聚糖纳米粒和叶酸偶联壳聚糖载双药纳米粒。测得叶酸偶联壳聚糖载双药纳米粒粒径390nm,zeta电位为+34.76mV,纳米粒形态规整,大小均匀。检测了叶酸偶联壳聚糖纳米粒中叶酸的含量,当叶酸活性酯与壳聚糖分子上游离氨基的比例为1:1时,每个壳聚糖上连接叶酸的量大致为38个。据文献报道,在叶酸-蛋白质偶联物上平均一个蛋白质上偶联3个叶酸分子已有较强的靶向性,说明该纳米粒具有较强的肿瘤靶向作用。以纳米粒粒径、阿霉素的包封率和载药量、姜黄素的包封率和载药量为指标,响应面法考察了壳聚糖浓度、TPP浓度、阿霉素浓度以及姜黄素浓度对各个响应值的影响,得出壳聚糖浓度与TPP浓度在特定范围内才能形成较好的纳米粒,浓度过低或过高都对反应不利,阿霉素浓度过低或过高会导致阿霉素的载药量与姜黄素的载药量均下降,姜黄素浓度与姜黄素的包封率和载药量成正比,与阿霉素的包封率和载药量成反比。