低温保存技术发展至今已成功在理论和实践中取得了进展。人体红细胞的长期低温保存对调节血液供需平衡,正常开展输血工作和保存稀有血型有着重要作用。迄今为止,人体红细胞的低温保存方法发展已较为成熟并成功应用于临床,主要包括4℃低温冷藏和高甘油(Gly)慢速冷冻保存。低温冷藏法的存储时间太短,冷链运输成本高,不适合在特殊地区使用。慢速冷冻法需使用高浓度的Gly作为低温保护剂(CPA),增加了临床操作的复杂度和难度,对红细胞的低温保存和输血带来了诸多不便。因此,寻找一种低温保存红细胞的新方法来降低CPA浓度具有探究价值。在此课题中:(一)利用低甘油快速冷冻保存法进行红细胞低温保存,探究CPA的种类和浓度对红细胞低温保存的影响。实验结果表明,添加海藻糖(Tre)可以提高红细胞的存活率。(二)使用已广泛应用于低温保存研究中的海藻酸盐水凝胶,提出基于水凝胶微纤维封装技术的红细胞低温保存新方法。实验结果表明,在使用超低浓度甘油(≤5%(w/v))作为CPA时,基于水凝胶微纤维封装技术的保存方法可以提高红细胞存活率。使用5%Gly+0.3 mol/L Tre作为CPAs时,红细胞存活率可提高到约80%。此外,解冻后的红细胞可直接用生理盐水进行甘油化洗涤。(三)实验中使用10%Gly作为CPA时,提出的新方法对红细胞存活率没有积极作用。通过分析水凝胶微纤维的差示扫描量热测试结果,发现海藻酸盐水凝胶对甘油的渗透性存在阈值。根据海藻酸盐低温结晶现象,提出基于水凝胶封装技术的低温保存可能的保护机制。由此展望,探索一种合适的复合型CPAs,或者寻找一种渗透性和生物相容性更好的水凝胶材料可能是提高红细胞存活率的潜在措施。本课题希望为红细胞的低温保存提供一个新的、可研究的方向。这对生物低温保存的研究具有一定的意义。