大鼠C6胶质瘤MR显像及靶向治疗的多功能纳米药物载体研究

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研究背景及目的近年来随着抗肿瘤药物的迅速发展,化疗在胶质瘤治疗中的地位越来越重要。阿霉素(doxorubicin,DOX)是临床上最常用的抗肿瘤药物之一,它抗肿瘤活性强,但其对正常组织和器官的毒副作用大,这严重限制了其在肿瘤治疗中的应用。因此构建一种可以携带DOX导向性药物输送载体对肿瘤治疗的研究具有非常重要的意义。本论文选用叶酸(folic acid,FA)修饰的载DOX Mn纳米粒子体系,不仅能使DOX在胶质瘤病灶部位富集,还可以通过MRI监测药物在体内的分布。本实验利用Mn纳米粒子对大鼠C6胶质瘤脑内及皮下肿瘤模型进行3T磁共振成像,并对它们的成像特征进行研究,可以更真实的观测肿瘤的生长规律;利用磁共振活体示踪法并且结合HE染色证实FA修饰的载DOX Mn纳米粒子体系对大鼠C6胶质瘤的治疗效果。材料和方法10只,SD大鼠,清洁级,雄性,250-280g;收集对数生长期的鼠C6胶质瘤细胞,建立大鼠C6脑胶质瘤模型,接种7d后行MR扫描,然后通过鼠尾静脉注射0.5ml Mn纳米粒子,分别于注射后5min、24h再次行MR扫描,扫描结束后取出脑内肿瘤组织行HE染色。10只,SD大鼠,清洁级,雄性,150-180g,收集对数生长期大鼠C6胶质瘤细胞,建立大鼠C6皮下胶质瘤模型,接种第7d先行MR平扫,再通过鼠尾静脉注射0.5ml Mn纳米粒子,分别于注射后5min、1h再次行MR扫描,扫描结束后剥离皮下肿瘤,行HE染色。建立大鼠C6皮下胶质瘤模型20只,随机分为四组,于接种后第10、11、12、14d分别经鼠尾静脉注射0.5ml FA修饰的载DOX Mn纳米粒子(FA-Mn-DOX)、生理盐水、DOX、载DOX Mn纳米粒子(Mn-DOX),接种后的10-18d荷瘤鼠每天行MR扫描,MR扫描采集的图像传至ADW4.4工作站,在肿瘤最大层面测量肿瘤的最长径(L)、最宽径(W),计算肿瘤的体积;随后将肿瘤完整剥离下来,石蜡包埋后行HE染色。结果成功建立了大鼠C6脑胶质瘤模型、大鼠C6皮下胶质瘤模型,并用Mn纳米粒子对肿瘤实现MR成像, MRI检测更准确反映脑内、皮下C6胶质瘤呈指数的生长规律。自第1次给药后至第18d各时间段,与对照组相比,实验各组肿瘤体积均有不同程度的下降,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色见FA-Mn-DOX组、DOX组、Mn-DOX组肿瘤细胞发生了一系列不可逆损害变化,其中以FA-Mn-DOX组最为显著。结论应用Mn纳米粒子对大鼠C6胶质瘤活体示踪MR成像,可以反映肿瘤的生物学特性,适用于肿瘤生长规律的观察和实验性治疗效果的评价;FA-Mn-DOX系一种多功能纳米药物载体,可作为磁共振靶向造影剂的同时,还具有双靶向治疗的作用,对大鼠C6皮下胶质瘤具有诊断和治疗的双重作用。
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