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目的探讨用间隙给药诱导法,诱导对羟基喜树碱耐药的膀胱肿瘤BIU-87/HCPT细胞,并进行多药耐药相关蛋白检测和交叉耐药测定,然后用维拉帕米逆转其耐药性。方法用羟基喜树碱对BIU-87细胞进行间隙给药法诱导培养,使其对羟基喜树碱产生耐药性,然后用MTT法测定其耐药指数以及对常用抗肿瘤药的交叉耐药性。用细胞免疫组化染色检测耐药相关蛋白P-gp、MRP1、Bcl-2和Survivin。先用MTT法测定维拉帕米的细胞毒性,然后用MTT法和流式细胞仪测定维拉帕米对BIU-87/HCPT细胞的耐药性逆转效果。结果经过5个月的耐药诱导,BIU-87/HCPT细胞的耐药指数提高了55倍。BIU-87/HCPT细胞对长春新碱、丝列霉素和顺铂的耐药性有不同程度的提高,尤以长春新碱提高幅度最大为26.88倍。而对阿霉素耐药性提高不明显。经细胞免疫组化染色检测P-gp和MRP1均为++,Bcl-2和Survivin均为+++。经MTT法检测,维拉帕米的浓度在10μg/ml时为低毒,在5μg/ml时为无毒。维拉帕米的浓度在10μg/ml以下时,浓度与逆转效率成正比(MTT法),10μg/ml时逆转效率达最大,为3.14倍。经流式细胞仪测定结果与MTT法基本符合,但逆转效果与敏感对照组相比,细胞死亡率仍有不小差距。结论改进后的间隙给药诱导法,能在较短时间内大幅提升耐药细胞的耐药指数。所诱导的耐药细胞BIU-87/HCPT细胞对其他多种抗肿瘤药有交叉耐药性,并能检测到耐药相关蛋白P-gp、MRP1、Bcl-2和Survivin的表达量增加。但维拉帕米逆转BIU-87/HCPT细胞的效率低于文献报道,这与肿瘤细胞产生多药耐药的机制复杂和BIU-87/HCPT细胞的P-gp表达量相对不太高可能有关,因此还需要进一步研究。